Analiza žolča in nalezljive bolezni. Bolezen žolčnih kamnov (holelitiaza) vzroki, diagnoza in zdravljenje Holesterolni žolčni kamni

Mikroskopski pregled žolča izvedel takoj po prejemu, saj celični elementi v žolču se z delovanjem žolčnih kislin in mil hitro uničijo.

Za mikroskopsko preiskavo vzamemo žolč brez primesi želodčnega in črevesnega soka (običajno pregledamo deleže B in C). Žolč prelijemo na petrijevke, izsesamo koščke sluzi in jih položimo na predmetno stekelce ter iz njih pripravimo več pripravkov. Preostali žolč centrifugiramo in iz usedline pripravimo tudi nativne pripravke. Skupno število zdravil mora biti vsaj deset.

Večji diagnostični pomen ima identifikacija epitelne celice , vendar le v primerih, ko je epitelij dovolj ohranjen, da je mogoče ugotoviti njegov izvor: za holecistitis je značilna identifikacija visokih prizmatičnih ciliiranih celic, za holangitis - majhne prizmatične celice jetrnih vodov ali visoke prizmatične epitelijske celice navadnega žolča. kanal, za patološke procese v dvanajstniku - velike cilindrične celice s kutikulo in resicami.

Kristali holesterola lahko najdemo v žolču zdravi ljudje. Izgledajo kot tanke, brezbarvne, štirikotne plošče z odlomljenim vogalom. Povečanje kristalov holesterola kaže na spremembo koloidne stabilnosti žolča.

Mikroliti - temne, velike ali večplastne tvorbe, sestavljene iz kalcijevih soli, sluzi in majhne količine holesterola. Mikrolitov običajno ne najdemo; njihovo odkrivanje v žolču praviloma kaže na kršitev koloidne stabilnosti žolča. Pogosto hkrati patološki proces najdemo še manjša (mikroskopska) zrnca različnih velikosti in barv, ki jih običajno imenujemo "pesek".

Kalcijev bilirubinat Je amorfna majhna zrna zlato rumene ali rjavkaste barve. Pogosto jih najdemo v žolču v kombinaciji z velikimi količinami kristalov holesterola. Kristali maščobnih kislin izgledajo kot tanke iglice. Njihov videz kaže na zmanjšanje topnosti maščobnih kislin zaradi vnetnega procesa in kršitev koloidne stabilnosti žolča.

Paraziti . V duodenalni vsebini najdemo vegetativne oblike nekaterih parazitov (najpogosteje

Analiza žolča je laboratorijska diagnostična metoda, ki vam omogoča določanje bolezni in predpisovanje pravilno zdravljenje. Ta študija se izvaja sočasno z drugimi pregledi bolnika. Analiza žolčne tekočine je zelo pomembna in informativna, vendar precej delovno intenzivna. Izvaja se lahko v katerem koli laboratoriju, kjer so klinični, bakteriološki, biokemijske preiskave. Hkrati se odvzeti material preučuje glede na fizikalne, mikroskopske, biokemične in bakteriološke parametre.

Analiza izločanja žolča se izvaja s pregledom vsebine dvanajstnika.

Sestavljen je iz:

• vsebino dvanajstniku;
• žolč;
• izločanje trebušne slinavke;
• želodčni sok.

Da bi bil material pravilno zbran, bolnik zjutraj ne sme jesti.

Frakcijski duodenalni pregled s sondo se izvaja v več fazah:

1. Bazalno izločanje žolča. Izloček se zbira iz lumna dvanajstnika in žolčnega kanala. Trajanje izbire je približno četrt ure. Žolč je svetlo slamnate barve z indeksom gostote od 1007 do 1015 in ima rahlo alkalno okolje.
2. Faza zapiranja Oddijevega sfinktra traja od 3 do 5 minut. Vsebino zbiramo od trenutka dajanja citokina, ki povzroči krčenje žolčnega rezervoarja, dokler se v sondi ne pojavi nova serija žolčne komponente.
3. Sprostitev žolčnega dela A se pojavi v 5 minutah. Začetek selekcije je odprtina Oddijeve mišice zapiralke, konec pa je odprtina Lutkensove mišice zapiralke. Tekočina ima zlato rumeno barvo.
4. Vnos porcije B se začne v trenutku odprtja Lütkensovega sfinktra s praznjenjem organa za kopičenje grenkobe in sproščanjem vezikalne tekočine temno rjave (temno olivne) barve in traja približno pol ure. Gostota žolča je od 1016 do 1035, kislost je 7 pH (+/- 0,5 enot).
5. Izločanje dela jetrnega žolča se začne v trenutku, ko preneha izločanje temno rjavega žolča. Žolčna tekočina svetlo rumene (zlate) barve se izloči v 20 minutah. Gostota tekočine 1007-1011, kislost od 7,5 do 8,2 pH.

Treba je opozoriti, da je običajno za vsak del žolča značilna prosojnost, kljub razliki v barvi. Pregled pod mikroskopom omogoča odkrivanje rahle vsebnosti epitelija in sluzi - to je normalno. Norma je tudi odsotnost kristalne mreže holesterola in kalcijevega bilirubinata; le v posameznih primerih opazimo njihovo prisotnost v delu C.

Žolč, pridobljen s to metodo, je takoj izpostavljen laboratorijske raziskave in naredi analizo:

• biokemični;
• histološki;
• mikroskopsko;
• na mikrofloro;
• za občutljivost na antibiotike.

Raziskava se izvede v 1,5 urah po sondiranju, saj encimi hitro uničijo snovi, potrebne za analizo. Rezultati frakcijske študije zagotavljajo informacije o funkcionalnih motnjah v žolčnem sistemu: diskinezija žolčnih vodov, hipo- ali hipertenzija rezervoarja žolča, Oddijevega sfinktra in cističnega kanala.

Analiza žolča določa pri bolnikih bolezni srca in ožilja povezanih s povečanjem krvni pritisk.

Na podlagi rezultatov sondiranja je mogoče določiti:

1. Vnetje notranji organi. To dokazuje kršitev preglednosti enega od delov izločanja žolča. Motnost in prisotnost kosmičev v delu A je znak prisotnosti duodenitisa, v delu B - vnetje žolčnega rezervoarja, v delu C - holangitis.
2. Vnetje v rezervoarju žolča in žolčnih kanalih. Na to kaže povečanje levkocitov v delih B in C.
3. Motnje v črevesju. Spremlja ga prisotnost prekomerne količine epitelija v delih B in C.
4. Vnetje drenažnega trakta žolča. To dokazujejo cilindrične celice.
5. Bolezen žolčnih kamnov in stagnacija grenke tekočine. Manifestira se s presežkom kristalnih mrež holesterola in kalcijevih kristalov bilirubina.
6. Helminthiasis (opisthorchiasis, fascioliasis, clonorchiasis) črevesja in žolčevodov. Določeno s prisotnostjo aktivnosti Giardia v žolčni tekočini.
7. Stagnacija žolča v rezervoarju in kanalih. Opazimo ga s povečanjem gostote žolča.
8. Razjeda na dvanajstniku, hemoragična diateza, onkološke neoplazme in zbijanja v trebušni slinavki in pilorusu želodca. Diagnosticira se z obarvanjem žolčne tekočine s krvavim izcedkom.
9. Virusni hepatitis in cirozo jeter. Na prisotnost teh bolezni kaže svetlo rumen odtenek dela A in bleda barva dela C.
10. Za hemolitično (suprahepatično) zlatenico je značilna temno rumena barva dela A in temna barva dela C.
11. Kronični vnetni procesi z atrofijo sluznice žolčnega kanala se odkrijejo v prisotnosti rahlo obarvanega dela B.
12. Sladkorna bolezen in pankreatitis. Za te bolezni je značilen povišan holesterol. Za pankreatitis je značilno zmanjšanje količine žolčnih kislin.

Bakteriološka kultura žolča razkrije okužbo z Escherichia coli, Klebsiella spp., Enterobacter spp., Peptostreptococcus, bakteroidi, Clostridium perfringens. Sejanje bakterij (Proteus, Escherichia colli, Klebsiella) in Pseudomonas aeruginosa ima neugodno prognozo in zahteva naročanje antibakterijska zdravila. Žolč je sterilen, bakteriološka kontaminacija povzroča vnetne procese v žolčnem organu in njegovih kanalih: holecistitis, holangitis, holelitiazo, jetrni absces.

Interpretacija rezultatov duodenalne intubacije ni 100% zanesljiva. Za potrditev diagnoze so bolniku predpisane dodatne krvne preiskave in ultrazvok. Za potrditev helminthiasis se opravi analiza iztrebkov.

Mikroskopski pregled številnih (5-8) delov nastale duodenalne vsebine je treba opraviti takoj po njihovem prejemu. To je posledica izrazitih litičnih lastnosti žolča: žolč po 5-10 minutah uniči epitelij in levkocite, zavite v ohlapno sluz, koloidna stabilnost nastalega žolča je motena, žolčne kisline in celo holesterol pa se oborijo.

Žolč iz epruvete vlijemo v petrijevko in ga pregledamo na beli in črni podlagi. S Pasteurjevo pipeto z bučko ujamemo luske sluzi, jih prenesemo na stekelce, pokrijemo s pokrovom in pregledamo pod mikroskopi (okular 10X, objektivi 20X in 40X).

Material za mikroskopsko preiskavo lahko ohranimo 1-2 uri tako, da nastalemu žolču dodamo 1/3 prostornine 10% nevtralnega formaldehida. Konzerviranje je učinkovitejše, če 10-20 ml nastalega žolča dodamo 2 ml 10% EDTA ali 1 ml (1000 enot) kontrikala (tzalol ali trasilol).

Žolč, pridobljen tudi s spiralno dvokanalno sondo, je kompleksen, heterogen sistem, ki ga sestavljajo želodčni sok, vsebina dvanajstnika in sam žolč. Kosmiči sluzi v žolču lahko prihajajo iz ust, nazofarinksa, pljuč, želodca in požiralnika. Pod vplivom encimov se celični elementi žolča hitro deformirajo in uničijo. Do dna epruvete pod vplivom klorovodikove kisline, izločki trebušne slinavke, bakterije, kristalne tvorbe (žolčne kisline, maščobne kisline, holesterol) lahko izpadejo iz žolča, kar oteži razlago lipolitičnih (lipogenih) lastnosti preučevanega žolča.

levkociti.

Levkocitne celice zaužitih iztrebkov dihalni trakt imajo bolj izrazito zrnatost, poleg njih so alveolarni makrofagi in kompaktna sluz. Levkociti ustne votline se običajno nahajajo na ozadju ne-keratinizirajočega stratificiranega skvamoznega epitelija. Levkociti želodčnega izvora se lahko kombinirajo z žleznim epitelijem. Želodčni sok pri takem bolniku običajno ne vsebuje klorovodikove kisline. Levkociti itd. žleznega epitelija, ki je prišel v žolč iz kislega želodca, predstavljajo gola jedra, ki ležijo na mehki vlaknasti sluzi.

Možno je, da levkociti iz kanalov trebušne slinavke, ki jih je prizadel vnetni proces, lahko vstopijo v žolč (kanalikularni pankreatitis). Pri kanalikularnem pakreatitisu so pankreasni kanali napolnjeni z eksudatom in levkociti. Ob upoštevanju vseh klinična slika Ko se v vsebini dvanajstnika levkocitov in cilindričnega epitelija odkrijejo kosmiči sluzi, se lahko domneva, da so vstopili v žolč iz kanalov trebušne slinavke.

Levkociti, najdeni v delu A (dvanajstnični žolč), kot tudi po dajanju magnezijevega sulfata v kombinaciji z visokim cilindričnim kutikularnim epitelijem, kažejo na prisotnost duodenitisa.

Epitel.

Cilindrični (prizmatični) epitelij, ki obdaja celotno površino dvanajstnika, ima v predelu, obrnjenem proti črevesni votlini, precej debelo kutikulo (kožo), ki je dobro vidna v nativnem preparatu. Kutikula je sestavljena iz mreže tankih prečk, med katerimi so ozki tubuli, ki zagotavljajo sesanje. Jedra duodenalnega epitelija so velika, ovalne oblike iztiskanje dna celice.

Začetni element žolčnega sistema so žolčne kapilare, katerih stene tvorijo membrane jetrnih celic. Žolčne kapilare na mestu njihove povezave z jetrnimi ploščami (žolčni vodi portalnih polj) imenujemo holangiole. Obloženi so s kubičnimi epitelnimi celicami, visokimi 10-12 µm, z velikimi okroglimi jedri.

Interlobularni žolčni kanali so obloženi s stolpčastimi epitelnimi celicami, visokimi 15-18 µm, z okroglimi jedri, ki se nahajajo blizu baze. Takšne epitelijske celice različnih velikosti pogosto najdemo v kombinaciji z levkociti v duodenalnem (A) in jetrnem (C) žolču pri bolnikih s holangitisom.

pri citološki pregled, cistični žolč je včasih mogoče zaznati stebraste epitelijske celice z višino 20-50 mikronov. V nativnih preparatih so običajno jasno vidna velika okrogla ali ovalna jedra, ki se nahajajo blizu baze celic; citoplazma je pogosto vakuolizirana, konča se na dnu celic z ostrim repom podobnim izrastkom - epitelijem žolčnika.

Celice sluznice žolčnika (vrhaste celice) so zelo redke, vendar jih je mogoče najti v žolču, pridobljenem med operacijo vnetega žolčnika. Te celice so še posebej dovzetne za razpad.

Skupni žolčni kanal je obložen z visokim stebrastim epitelijem, katerega celice se močno razlikujejo od drugih podobnih epitelijskih celic. To so precej dolge (do 37 mikronov), zelo ozke celice s stisnjenimi in podolgovatimi jedri ("match cell"). Prisotnost teh celic v duodenalnem žolču v prosti obliki in v kombinaciji z levkociti kaže na vnetje skupnega žolčnega voda (holedohitis).

levkocitoidi

Levkocitoidi so okrogle velike celice, za 1/3 večje od levkocitov. So celice cilindričnega epitelija dvanajstnika, ki so se zaradi degeneracije zaokrožile. Levkocitoidi se pojavijo s povečanim izločanjem žolča iz žolčnika v dvanajstnik. Veliko število V brezbarvni duodenalni vsebini z obstruktivno zlatenico lahko najdemo levkocite. Pri mladih s povečano nevrohumoralno razdražljivostjo opazimo veliko število levkocitoidov. V kombinaciji s stebrastim epitelijem dvanajstnika lahko opazimo levkocitoide pri duodenitisu oz. peptični ulkus. Običajno je za takšne bolnike značilna visoka kislost želodčne vsebine.

Sedimentni elementi

Odkrivanje kristalnih in amorfnih sedimentnih tvorb žolča v duodenalni vsebini kaže, da je izgubil svojo koloidno stabilnost. Razlog za njihov pojav je lahko vnetni proces v žolčnih kanalih, kršitev koloidne stabilnosti zaradi dolgotrajnega stanja ali vstopa želodčne vsebine v žolč.

Diagnostične vrednosti so naslednje kristalne tvorbe v žolču: mikroliti, kristali holesterola, žolčne in maščobne kisline, kalcijev bilirubinat in rjavi filmi žolčnika.

Mikroliti

Mikroliti so temne, okrogle ali večplastne kompaktne tvorbe, včasih s koncentričnimi progami; sestojijo iz apna, sluzi in majhne količine holesterola. Za odkrivanje mikrolitov v žolču se uporablja reakcija Salkovskega.

Metodologija. Kapljico koncentrirane žveplove kisline prinesemo na pokrovno steklo, pod katerim se nahajajo proučevani kristali ali mikroliti, in spustimo tako, da se dotakne pokrovnega stekla. Na drugo stran pokrivnega stekla nanesemo filtrirni papir. V tem primeru kislina doseže proučevane kristale. Če mikroliti vsebujejo holesterol, se stopijo in dobijo rožnato ali rdečkasto barvo. Čisti holesterol, ki se topi pod vplivom žveplove kisline, postane svetlo rdeč. Mikrolite največkrat najdemo v zadnjem delu žolča (B) in delu rezidualne kontrakcije žolčnika (BC).

holesterol.

Tanke brezbarvne štirikotne plošče, včasih z "zlomljenim" vogalom, ki se med seboj prekrivajo in se zdi, da tvorijo stopnice (slika 87). Njihovo odkrivanje v žolču je običajno povezano s kršitvijo njegove koloidne stabilnosti zaradi nepravočasnega pregleda. Običajno se kristali holesterola nahajajo v majhnih količinah. Za patologijo žolčevod odstotek zaznave kristalov holesterola je veliko večji, njihovo število pa je večje.

Kalcijev bilirubinat

Kalcijev bilirubinat je amorfna zrna rjavega, črnega, rjavega ali zlato rumenega pigmenta. Pogosto najdemo v kombinaciji s kristali holesterola v delu A žolča, ko se zadržuje v skupnem žolčnem vodu - in v delu BC. Kristali kalcijevega bilirubinata niso odkriti pri zdravih ljudeh, najdemo jih le v žolču starejših ljudi, ki trpijo zaradi dolgotrajne, nepopolne stagnacije žolča in njegove okužbe.

Kristali maščobnih kislin.

Nežne tanke brezbarvne iglice, ki se ob segrevanju naravnega zdravila na plamenu alkoholne svetilke spremenijo v kapljice, imajo diagnostično vrednost le, če želodčna vsebina ne pride v žolč. Označuje znižanje pH žolča zaradi vnetni proces, bakterioholija, diskrinija in zmanjšana topnost maščobnih kislin. Najdemo jih v istih delih žolča in z isto patologijo žolčnega trakta kot kristali holesterola in kalcijevega bilirubinata.

Žolčne kisline.

Majhna sijoča ​​rjavo-rumena ali siva zrna. Najpogosteje se oborijo v velikih količinah, ko kisla želodčna vsebina vstopi v žolč. Zrna žolčne kisline včasih najdemo v žolču žolčnika, zbranem pred holecistektomijo. Žolčne soli so lahko del žolčnih kamnov. Odkrivanje kristalov žolčne kisline v čistih delih duodenalnega žolča v obliki usedline ali v sluzi kaže na diskrinijo.

Rjavi filmi.

So usedline sluzi in žolča na notranja površinažolčnik. Pod mikroskopom so podobni majhnim delčkom zlomljene porcelanaste posode. Najdemo ga v žolču žolčnika pri bolnikih s patologijo žolčnika.

Artefakti.

Artefakti, najdeni v žolču, vključujejo delce duodenalne cevi, kristale magnezijevega sulfata in delce pokrovnih stekel.

Protozoe, helminti, glive.

Pri pregledu žolča najdemo jajčeca jetrnega metlja, mačjega metlja, suličastega metlja, kitajskega metlja, pa tudi posameznike strongilidov in trihostrongilidov, vegetativno obliko Giardia in gliv iz rodu Candida. Diagnostična vrednost mobilnih in nepokretnih oblik helmintov in protozojev je enaka.

Vodnik do praktične vaje glede na klinično laboratorijska diagnostika/ Ed. prof. M.A. Bazarnova, prof. V.T. Morozova.- K.: Vyshcha School, 1988.- 318 str., 212 ilustr.

Nepogrešljiv pogoj za mikroskopsko analizo duodenalne vsebine je takojšen pregled, ko se žolč sprosti. Če študije ni mogoče izvesti takoj, se material ohrani 1-2 uri z dodajanjem nevtralnega formalina (10% raztopina - 1/3 prostornine), trasilola (1 ml, tj. 1000 enot na 10-20 ml). Preglejte usedlino (kapljice žolča z dna epruvete) iz več obrokov in čim več kosmičev sluzi.

levkociti odkriti v kosmičih sluzi po natančnem pregledu številnih vidnih polj. Levkociti, obarvani z žolčem, ne smejo imeti diagnostične vrednosti, saj oblikovani elementi katerega koli izvora, ko izgubijo sposobnost preživetja, se hitro obarvajo, ko jim dodamo žolč, medtem ko celice, zaščitene s sluzom, ostanejo neobarvane (stanje parabioze). Glavno merilo za izvor levkocitov iz določenega segmenta žolčnega sistema so pogoji (od katere funkcije vsebine dvanajstnika).

Kolumnarni epitelij najdemo v sluznih pramenih posamično in v plasteh. Z določeno spretnostjo je mogoče razlikovati epitelij žolčevodov, mehurja in dvanajstnika ter tako izvajajo lokalno diagnostiko vnetnega procesa (ki ga spremlja luščenje epitelijskih celic). Epitel jetrnažolčni vodi - nizka prizmatična, okrogla jedra, ki se nahajajo blizu baze, brez povrhnjice. Osnovni epitelij žolčnik– visoko prizmatično z relativno velikim okroglim (ali ovalnim) jedrom, ki se nahaja blizu baze, in pogosto vakuolizirano citoplazmo.

Kristali holesterola– imajo videz tankih brezbarvnih štirikotnih plošč z odlomljenim koncem. To ni neposreden dokaz prisotnosti žolčnih kamnov, vendar kaže na možnost, kar kaže na izgubo koloidne stabilnosti žolča.

Kalcijev bilirubinat- rjave, rumene ali temno rjave kopice (kepe) pigmenta, le občasno najdemo pri praktično zdravih ljudeh. Če jih najdemo v velikih količinah (v kosmičih sluzi in kapljicah žolča) skupaj s kristali holesterola, je tudi pokazatelj spremembe koloidnih lastnosti žolča (in možne tvorbe kamnov).

Žolčne kisline vidna pod mikroskopom v obliki majhnih sijočih rjavkastih ali svetlo rumenih zrnc, ki pogosto prekrivajo celotno vidno polje v obliki amorfne mase. Odkrivanje obilne usedline žolčnih kislin v "čistih" frakcijah duodenalnega žolča z veliko previdnostjo (zaradi težav pri popolni odstranitvi primesi želodčnega soka) se lahko obravnava kot indikator disholije.

Maščobna kislina– kristali v obliki nežnih dolgih ali kratkih iglic, pogosto združeni v šopke. Lahko se šteje za znak znižanja pH žolča zaradi vnetnega procesa (bakterioholija) in zmanjšanja topnosti maščobnih kislin v žolču.

Mikroliti(mikroskopski kamni) - temne, svetlobno lomne okrogle ali večplastne tvorbe, ki se po svoji kompaktnosti bistveno razlikujejo od grozdov kristalov holesterola in po velikosti presegajo jetrni "pesek". Sestavljeni so iz apna, sluzi in le majhne količine holesterola. Mikroliti se najpogosteje nahajajo v kosmičih sluzi in žolčnih kapljicah (sedimentu) iz porcije B, C(potrebno je pregledati veliko število zdravil). Ker so mikroliti povezani s procesom nastajanja kamnov, ima njihovo odkritje diagnostično vrednost.

Vegetativne oblike Giardia pogosto najdemo v duodenalni vsebini (v vseh delih). Giardia je praživali, ki živijo v dvanajstniku (in ne v žolčnih vodih); zaradi dražilnega učinka sonde in magnezijevega sulfata privlačijo vse frakcije žolča.

MIKROSKOPSKIštudijo je treba opraviti takoj po pridobitvi žolča, ker levkocite in druge celice uničijo encimi v prvih 5-10 minutah.

rdeče krvne celice. Te celice nimajo diagnostične vrednosti, saj je njihov videz lahko povezan s travmo med sondiranjem.

levkociti. Levkociti so lahko neobarvani ali obarvani z žolčem. Zaključek o vnetju se naredi ob upoštevanju niza simptomov: prisotnost sluzi, motnost in več kot 10 levkocitov v vidnem polju. Prisotnost v vidnem polju kristalov holesterola (kvadrat z odlomljenim enim vogalom) ali kalcijevega bilirubinata (kristalni žarki, ki segajo iz zrna peska) kaže na holelitiazo ali nagnjenost k njej. Pod mikroskopom lahko vidite Giardia, jajčeca metljajev in same metljaje (kitajski in mačji metljaj).

BAKTERIOLOŠKI pregled - ob upoštevanju asepse se posejejo porcije B in C. Ob vnetju se zasejejo mikrobi, najpogosteje bacili tifusa ali paratifusa, lahko pride do kokalne oblike.

Kemijska raziskava - v porcijah B in C se določi vsebnost holesterola, bilirubina in žolčnih kislin. Običajno niha v precej velikih mejah.

Vse dele žolča, ki vsebujejo suspendirane kosmiče sluzi in/ali usedline na dnu epruvet, je treba pregledati pod mikroskopom. Upoštevati je treba, da se proteolitični encim trebušne slinavke tripsin nahaja v aktivno stanje in hitro razgradi celične elemente. Mikroskopski pregled žolča je treba opraviti takoj, ko dobimo naslednjo epruveto (frakcijo), saj bodo v nekaj minutah celični elementi dvanajstnika in žolčnega sistema, obdani z ohlapno sluzjo, delno ali popolnoma lizirani. Celični elementi dihalnih poti (nosna sluz, sputum), obdani z gosto in gosto sluzjo, ostanejo dolgo časa v vsebini dvanajstnika. Pri daljšem stanju in vitro se poruši koloidna stabilnost nastalega žolča, iz raztopine izpadejo kristali žolčnih kislin ali holesterola, bilirubin oksidira v biliverdin, kar spremlja ozelenitev žolča. 

Način priprave
Vsebino epruvete vlijemo v petrijevko, položeno na črn list papirja.

S pipeto zaporedno odstranjujemo suspendirane kosmiče sluzi, iz njih izdelamo nativni preparat in ga pokrijemo s pokrovnim stekelcem. Iz usedline, ki nastane na dnu epruvete, je treba pripraviti ločen pripravek.

Sluz, ki se nahaja v eni ali drugi frakciji duodenalne vsebine, se lahko nanaša ne le na žolčni sistem, ki ga je prizadel vnetni proces (intra- in ekstrahepatični žolčni kanali, žolčnik, skupni žolčni kanal). Med duodenalno intubacijo z enokanalno tanko sondo slina, nosna sluz, sputum in želodčna sluz vstopijo v dvanajstnik. Posledično levkociti, najdeni v sluzi duodenalne vsebine, morda ne kažejo na vnetje dvanajstnika in žolčnega sistema. Izvor levkocitov pomaga ugotoviti odkrite epitelne celice in druge elemente.

Sluz iz dihalnih poti je nasičena z zračnimi mehurčki, zato je vedno na površini cevke z duodenalno vsebino.

To sluz je treba pred mikroskopiranjem odstraniti s pipeto.

Če elementi sluzi zaidejo v pripravke, pripravljene za mikroskopijo, je treba upoštevati naslednje znake:
levkociti sline in nosne sluzi se nahajajo na ozadju ravnega epitelija in velikega števila bakterij;
levkociti izpljunka se nahajajo na ozadju ciliiranega epitelija, alveolarnih makrofagov in mielina;
levkociti želodčne sluzi so predstavljeni z golimi segmentiranimi jedri na ozadju epitelija v obliki majhnih ovalnih golih jeder enake velikosti (levkociti, ki niso povezani z žolčnim sistemom in dvanajstnikom, ne smejo biti vključeni v odgovor!);
prosto ležeči levkociti, obarvani z žolčem, nimajo diagnostične vrednosti;
mrtvi levkociti iz katerega koli žarišča vnetja, ki vstopijo v žolč, so žolč takoj obarvani rumeno ali temno rumeno;
levkociti v stanju parabioze niso obarvani.

Patologija
Pri vnetju intrahepatičnih kanalov (holangitis, holangiohepatitis) se levkociti kombinirajo z nizkim prizmatičnim epitelijem, ki obloži intrahepatične kanale.

Ta epitelij je visok 15-18 µm, z jedri, ki se nahajajo blizu dna celice. Če pa se v sluzi določenega dela nahaja le nizek kolumnarni epitelij v velikih količinah, diagnoza holangitisa ali holangiohepatitisa ni izključena, saj se levkociti običajno uničijo neposredno v intrahepatičnih žolčnih vodih.

Nizek prizmatični epitelij najdemo pri holangitisu ali holangiohepatitisu v kosmičih sluzi pegenogenega žolča (deli žolča "C"). Pri holedohitisu (vnetju skupnega žolčnega kanala) se levkociti kombinirajo s "spigeoznim" epitelijem, ki obdaja skupni žolčni kanal (dolg in ozek stebrasti epitelij do 40-50 v višino in 5-6 µm v širino). Pri holedohitisu se levkociti s "spigegnoznim" epitelijem nahajajo v kosmičih sluzi v vseh frakcijah žolčnih delov "A", "B" in "C" ali pa so predstavljeni kot drobnozrnata masa kot posledica njihove razgradnje. Velika količina tega epitelija, ki pokriva celotno vidno polje, tudi brez kombinacije z levkociti, omogoča postavitev ali potrditev diagnoze holedohitisa.

V primeru holecistitisa je kolumnarnega epitelija, ki obdaja žolčnik, praktično nemogoče zaznati v delu žolča "B", saj se kolumnarni epitelij žolčnika med vnetjem zavrne in levkociti in vivo uničijo neposredno v žolčnik in v delu žolča "B".

Pri holecistitisu se med operacijo levkociti ne nahajajo v lumnu, temveč neposredno v vneti steni žolčnika, kar potrjuje mikroskopija žolča, pridobljenega med punkcijo žolčnika pred njegovo odstranitvijo. Holecistitis med duodenalno intubacijo lahko ocenimo po temno zeleni ali zelenkasti barvi novo pridobljenega cističnega dela žolča.

Levkociti pri vnetju dvanajstnika in duodenitisu se nahajajo na ozadju cilindričnega kutikularnega epitelija. Na prosti površini tega epitelija, obrnjeni proti votlini dvanajstnika, je precej debela povrhnjica, ki tvori progasto obrobo, ki je jasno vidna v nativnih preparatih. Kutikula je sestavljena iz mreže tankih prečk, med katerimi so ozki tubuli. Skozi te tubule poteka absorpcija. Cilindrični kutikularni epitelij ima višino 45-52 mikronov, širino v apikalnem delu 12-16 mikronov, velika jedra ovalne oblike, vretenasto iztiskanje spodnjega dela celic.

Pri duodenitisu se v sluzi vseh frakcij duodenalne vsebine nahajajo grozdi in velike plasti kutikularnega epitelija v obliki palisade ali satja. Epitel dvanajstnika je nenehno poškodovan zaradi kisle vsebine želodca, zato se običajno popolnoma obnovi v 2 dneh.

Glavna merila za pripadnost žolčnim levkocitom so pogoji in ozadje njihovega odkrivanja. Levkociti iz žolčnih kanalov in dvanajstnika se nahajajo v sluzi na ozadju stolpičnega epitelija ustreznega območja. Običajno so brezbarvni ali rahlo rumenkasti, zrnati in hitro podvrženi proteolizi. Pri bolnikih z očitno patologijo žolčnega sistema je treba dolgo in trdo iskati levkocite na ozadju epitelija skupnega žolčnega kanala in epitelija majhnih intrahepatičnih žolčnih kanalov. Pogosteje najdemo le sluz, ki vsebuje drobnozrnato maso, ki se nahaja v obliki majhnih zrnatih madežev, ki nejasno spominjajo na obrise stolpičnega epitelija in levkocitov. Takšni preparati so pridobljeni iz frakcij, ki niso bile pravočasno pripravljene za mikroskopiranje. Pri holangitisu in holecistitisu septične narave in stagnaciji žolča lahko levkociti in epitelij skupnega žolčnega voda in žolčnika v domačih pripravkih pokrivajo vsa vidna polja.

V sluzi duodenalne vsebine (deli žolča "A" in / ali "C") najdemo okrogle, dokaj velike (do 18-22 mikronov) celice, imenovane levkocitoidi, ki so zaobljeni cilindrični epitelij dvanajstnika. . V preparatih, obarvanih z azurno H-eozinom, so v teh celicah jasno vidni 3-4 jedrni fragmenti, ki so izgubili svojo specifično strukturo kromatina (karioreksija). Med levkocitoidi najdemo eozinofilce in limfocite. Če mikroskopist zamenja levkocitoide za levkocite, to vodi do prevelike diagnoze vnetnih procesov v žolčnem sistemu in dvanajstniku.

Nekateri levkocitoidi v hitro tekočih delih žolča "B" in "C" so lahko cističnega izvora. Izločanje lusk sluzi z levkocitoidi opazimo tako normalno kot pri patologiji. Posebno veliko število levkocitoidov v duodenalni vsebini opazimo pri mladih s povečano nevrohumoralno razdražljivostjo.

Sedimentne tvorbe žolča
Vsebnost kristalnih in amorfnih sedimentnih tvorb v žolču kaže na izgubo njegove koloidne stabilnosti in omogoča sum na diskrinijo ali prisotnost kamnov v žolčnih vodih. 

Diagnostične vrednosti so naslednje sedimentne formacije:
mikroliti;
kalcijev bilirubinat;
kristali holesterola;
kristali maščobnih kislin;
kristali žolčne kisline.

Če je sedimentnih tvorb veliko, se na dnu epruvete tvori oborina, iz katere je treba pripraviti nativni pripravek. Da bi to naredili, kapljico usedline nanesemo na predmetno stekelce in pokrijemo s pokrovnim stekelcem.

Mikroliti so temne, okrogle ali večplastne tvorbe, ki lomijo svetlobo; najdemo jih pogosteje v delu žolča “BC”, tj. A” pri bolnikih s klinično hudo patologijo žolčnega trakta. Mikroliti okrogle oblike (sferomikroliti) imajo koncentrično strukturo. Sestava sferomikrolitov vključuje sluz, apno in majhno količino holesterola.

Kristali holesterola so brezbarvne, prozorne, pravokotne plošče, običajno z zarezami v obliki stopnic. Kristali holesterola se raztopijo v koncentrirani žveplovi kislini in tvorijo rdeče spojine. Kristale holesterola včasih običajno najdemo pri praktično zdravih ljudeh, ženskah - 3-4 dni prej menstrualni ciklus, bolniki z vročino. Včasih se holesterol med dolgotrajnim skladiščenjem obori v čistih delih žolča.

Pri patologiji žolčnega trakta se kristali holesterola v delu žolča "A" pogosto nahajajo v velikih količinah v obliki usedline na dnu epruvet ali v kosmičih sluzi, kar je razloženo z začasno izgubo koloidne stabilnosti žolč. Zato vsebnost velikega števila kristalov holesterola v žolču ni neposreden dokaz prisotnosti žolčnih kamnov in kaže le na visoko tveganje za njihov nastanek. V tem primeru je priporočljivo izvesti preventivni ukrepi namenjen preprečevanju nastajanja kamnov v žolčnem traktu.

Kalcijev bilirubinat - rjave, rumene ali črne grudice, kepe pigmenta, najdemo v velikih količinah v delu žolča "A" pri starejših ljudeh z boleznimi jeter, dolgotrajno nepopolno stagnacijo žolča in njegovo okužbo (bakterioholija). Kalcijev bilirubinat v posameznih kosmičih sluzi, pogosto v kombinaciji s kristali holesterola in zrnci žolčnih kislin, služi kot osnova za nastanek kamnov. Kalcijev bilirubinat se običajno ne pojavi.

Kristali žolčnih kislin so majhna, sijoča, rjavkasta, svetlo rumena ali siva zrnca, ki pogosto pokrivajo vsa vidna polja v sluzi naravnega zdravila. V žolču dvanajstnika (del žolča "A") opazimo veliko število amorfnih kristalov prostih žolčnih kislin s primesjo kislega želodčnega soka. V tem primeru postane duodenalni žolč enakomerno moten, na dnu epruvete pa se nabere obilna usedlina. Rezultati študije žolča, kontaminiranega z želodčnim sokom, niso vključeni v obrazec za odgovore.
Žolčne soli so del žolčnih kamnov, zato odkrivanje obilne usedline žolčnih kislin v nekontaminiranih frakcijah dela žolča "A" pri pH 7,0-7,5 in relativni gostoti 1,010 g/l kaže na diskriminacijo.

Kristali maščobnih kislin so dolge, občutljive iglice, pogosto združene v šopke. Če se kristali maščobnih kislin nahajajo samo v delu B žolča, potem je to verjetno posledica zmanjšanja pH žolčnika žolčnika zaradi vnetnega procesa, pa tudi zmanjšanja njihove topnosti v žolču. Maščobne kisline v velikih količinah se odcepijo od žolčnega lecitina pod vplivom encima lecitinaze, katerega aktivnost se poveča v prisotnosti soli deoksiholne kisline, glutaminske kisline in bakterij. V anacidu želodčni sok vsebuje veliko maščobnih kislin, med duodenalno intubacijo z enokanalno sondo se odkrijejo v delih žolča "A", "B" in "C".

Študija sluzi ima pomembno vlogo pri mikroskopiji duodenalne vsebine. V nativnem preparatu ga lahko zaznamo v obliki bele ali rumene mase, grudic, filmov ali drobcev filma. O izvoru sluzi lahko sodimo po epitelnih celicah, ki jih najdemo v njej, ki pripadajo enemu ali drugemu delu žolčnega sistema ali dvanajstniku, pa tudi po kristalih, mikrolitih in drugih celičnih in neceličnih elementih, ki niso povezani z žolčnim sistemom.