Helicobacter pylori için dışkı analizi. Helicobacter testleri: türleri, güvenilirliği, hazırlanışı ve sonuçları Helicobacter için dışkı testinin adı nedir

Helicobacter pylori analizi, kronik gastrit ve mide ülseri semptomlarının varlığında reçete edilir, çünkü bu bakteri bu hastalıkların etken maddesidir. Nedir, hangi durumlarda çalışma yapılmalı, sonuçlar nasıl yorumlanmalı ve enfeksiyon nasıl tedavi edilmeli?

Mikroorganizmanın adı, yaşadığı ortamı (midenin pilorik bölümünü) belirten “pylori”den gelir ve şeklinin özelliği “spiral biçimli” anlamına gelen “heliko”dur.

Helicobacter testleri

HP enfeksiyonunu teşhis etmek için çeşitli yöntemler vardır (Helicobacter pylori için HP kısaltması), farklı güvenilirliğe sahiptirler ve zaman ve maliyet açısından farklılık gösterirler. Hangi yöntem daha hızlı ve daha ucuz, hangisi sonucu daha doğru gösterecek?

Yöntemler laboratuvar teşhisi Helicobacter pylori enfeksiyonları invaziv ve invaziv olmayan olarak ikiye ayrılır. İnvaziv olanlar, biyomateryalin toplanması (biyopsi) ve ardından sitolojik inceleme ile birlikte endoskopiyi içerir.

Non-invaziv testlerin en bilgilendirici olanları, kanda Helicobacter pylori'ye karşı antikorların, dışkıda H. pylori antijeninin varlığını belirleyen immünolojik çalışmalar, bakterinin genetik materyalini ortaya çıkaran PCR testleri ve nefes testleridir.

PCR

Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR), helikobakteriyozun etken maddesinin DNA fragmanlarının tanımlanmasını sağlayan moleküler bir genetik çalışmadır. İncelenen biyomateryal olarak dışkı kütleleri kullanıldı. Analiz sırasında, biyomateryalden bakteriyel DNA'nın bir bölümü izole edilir ve bu daha sonra özel bir cihazda (bir amplifikatör) birçok kez kopyalanır. DNA miktarı ileri tespit için yeterli olduğunda, örnekte Helicobacter pylori'ye özgü bir genomik fragmanın bulunup bulunmadığı belirlenir. Olumlu bir sonuç, Helicobacter pylori enfeksiyonunun varlığı anlamına gelir. PCR analizi vücutta yabancı bir mikroorganizmanın varlığını% 90-95 doğrulukla doğrulamanıza olanak tanır. Normalde Helicobacter pylori'nin genetik materyali test materyalinde tespit edilmez.

ELISA

İmmünolojik yöntemler doğrudan patojeni belirlemez, ancak karakteristik antijenlerine karşı antikorları tespit eder.

Helicobacter pylori enfeksiyonu kronik gastrit, mide ülseri ve duodenum, midenin kötü huylu tümörleri (adenokarsinom, B hücreli lenfoma).

Antikorlar için kanı test etmenin ana yöntemi, enzime bağlı immünosorbent tahlilidir (ELISA) - Helicobacter pylori'ye karşı IgA, IgM ve IgG sınıflarının antikorlarının seviyesinin kantitatif belirlenmesi. ELISA ayrıca enfeksiyon tedavisinin etkinliğini değerlendirmenize de olanak tanır. Evet, üretim IgM antikorları Helicobacter pylori'ye – işaretleyici akut aşama işlem. İlk enfeksiyondan birkaç hafta sonra IgM kaybolur. Hastalık ilerledikçe ve ilerledikçe kronik form IgA sınıfının antikorları, ardından IgG tespit edilir. Yüksek seviye konsantrasyonları uzun süre kanda kalır. Yöntemin duyarlılığı %87-98'dir.

İmmünoblotlama

İmmünoblotlama, hem maliyet hem de analizin gerçekleştirilmesinin karmaşıklığı açısından diğer immünolojik yöntemlerden önemli ölçüde düşüktür, ancak yalnızca hastanın kan serumuna sahip olarak Helicobacter pylori suşunun özellikleri hakkında veri elde etmek yalnızca onun yardımıyla mümkündür (tabanlı) CagA ve VacA spesifik antijenlerini üretip üretmediğine bağlıdır.

Solunum testleri

Nefes testi – hastanın soluduğu havadaki H. pylori üreazının üre hidroliz ürünlerinin belirlenmesi. Çalışma, bakterinin hidrolitik enzim üreaz üretme yeteneğine dayanıyor. Sindirim sisteminde üreaz, üreyi parçalayarak karbon dioksit ve amonyak. Karbondioksit nefes alma sırasında akciğerlere taşınarak havaya salınır, miktarı özel bir cihazla üreaz analizi için kaydedilir. Helicobacter için nefes testleri karbon ve amonyak olarak ikiye ayrılır.

Mikrobiyolojik yöntemler

Mikrobiyolojik ve bakteriyolojik yöntemler daha fazla zaman gerektirdiğinden daha az kullanılmaktadır. Dışkıda bakteriyolojik kültür, patojen kültürünün izolasyonu ve antibiyotiklere duyarlılığının belirlenmesini içerir. Çalışma sırasında dışkı, Helicobacter kolonilerinin büyümesine uygun bir büyüme ortamına yerleştirilir. Belirli bir süre sonra kültür mikroskop altında incelenir, kolonilerin sayısı ve özellikleri not edilir.

Helicobacter pylori enfeksiyonunu gösterebilecek ana belirtiler hastalığın tipik semptomlarıdır. gastrointestinal sistem.

Yöntem seçimine ilişkin karar, ilgili hekim tarafından verilir. Bir hastaya HP enfeksiyonu tanısı konursa hastanın aile üyelerinin muayene edilmesi önerilebilir.

Analiz için hazırlanıyor

Helicobacter testi yaptırmak için özel bir hazırlığa gerek yoktur ancak takip edilmesi önemlidir. Genel kurallarçünkü yalnızca doğru şekilde toplanan materyal sonucun güvenilirliğini garanti eder. Kural olarak, tüm testler aç karnına, yani en az sekiz saat yemekten uzak durulduktan sonra yapılır. Çalışmadan önce alkol, sigara, yağlı ve kızarmış yiyecekler yemekten kaçınmalısınız. Örneğin dışkı analizi için bağımsız olarak malzeme toplarken, herhangi bir yabancı kalıntı (örneğin, deterjanlar tuvaleti veya lazımlığı temizlemek için kullanılan) sonuçları bozabilir.

Test alırken önemli bir kural: Malzemeyi almadan önce bir ay boyunca hasta antibiyotik veya mide hareketliliğini uyaran ilaçlar almamalıdır.

Sonuçların şifresi nasıl çözülür?

Niteliksel bir analiz yapılmışsa (vücutta Helicobacter bakterisinin varlığının belirlenmesi), sonuç formunda yalnızca iki seçenek bulunabilir - "negatif" veya "pozitif". Analiz yöntemi niceliksel bir değerlendirme içeriyorsa, sonuçların normları tekniğe, laboratuvara, ölçü birimlerine ve diğer faktörlere bağlıdır, bu nedenle analiz sonuçlarını yalnızca doktor yorumlayabilir, aynı zamanda nihai tanıyı koyar ve tedaviyi reçete eder.

Helicobacter pylori ve özellikleri

Geçen yüzyılın 70'li yıllarına kadar mideye giren herhangi bir bakterinin etki altında öldüğüne inanılıyordu. hidroklorik asit, lizozim ve immünoglobulin. 1989'da araştırmacılar, gastrit hastası bir hastanın mide mukozasından spiral şekilli bir mikroorganizmayı saf biçimde izole edip yetiştirmeyi başardılar. Helikobakter bakterisi pilori

Non-invaziv testlerin en bilgilendirici olanları, kanda Helicobacter pylori'ye karşı antikorların, dışkıda H. pylori antijeninin varlığını belirleyen immünolojik çalışmalar, bakterinin genetik materyalini ortaya çıkaran PCR testleri ve nefes testleridir.

Mikroorganizmanın adı, yaşadığı ortamı (midenin pilorik bölümünü) belirten “pylori”den gelir ve şeklinin özelliği “spiral biçimli” anlamına gelen “heliko”dur.

Bakterinin bulaşması genellikle kirli yüzeylerle temas, tükürük yoluyla, havadaki damlacıklar yoluyla, enfekte hastayla temas, kişisel hijyen kurallarına uyulmaması, yeterince temiz olmayan sebze ve meyvelerin tüketilmesi veya kontamine kaynaklardan gelen sular sonucunda ortaya çıkar.

Dış görünüş klinik semptomlar bağışıklık durumuna bağlıdır. Enfekte insanlar arasında asemptomatik taşıyıcılık da meydana gelir, çünkü mikrop belirgin bir şekilde uzun süreli parazitizm yapabilir. klinik bulgular ve konağın bağışıklık sistemiyle çatışır. Bu durumda bakteri inaktif bir form alır ve kendisi için uygun koşullar ortaya çıktığında aktivitesini artırır. Ancak patojenik mikroorganizma, inaktif durumda bile mide ve duodenumun duvarlarına zarar verebilir. İnflamatuar değişikliklerin gelişmesi mukoza zarının atrofisine ve gelişmesine yol açabilir

Helicobacter için dışkı testi, vücutta bakteri varlığını doğrulayan veya reddeden teşhis türlerinden biridir. Ayrıca tedaviyi izlemek için de yapılır. Helicobacter pylori için dışkı testi, biyomateryali analiz eden, invaziv olmayan (endoskopi gerektirmeyen) bir yöntemdir.

Helicobacter pylori tanısıyla ilgili iki terim vardır - analiz sonucunun yapıldığı "duyarlılık" ve "özgüllük".

Duyarlılık, bir tekniğin olumlu sonuç verme yeteneğidir. Bu, gerçekleştirilen toplam test sayısına göre tespit edilen enfeksiyon yüzdesini belirler. Bu parametrenin hesaplanması oldukça kolaydır.

Spesifiklik ─ teşhis koyma yeteneğidir yanlış pozitif sonuçlar bakteri yokluğunda. Bu parametre, bir grup sağlıklı insandaki olumsuz yanıtların yüzdesini belirler.

Önemli! Mide ve duodenumun peptik ülseri tanı için mutlak bir göstergedir.

Bu analiz hangi durumlarda reçete edilir:

1. Onkolojik veya kanser öncesi ile ilgili hastalıklar. Analiz mide lenfoması için önemlidir, çünkü erken aşamalar kemoterapi kullanılmadan sadece antibakteriyel tedavi gerçekleştirilir.
2. Atrofik gastrit.
3. Bağırsak metaplazisinin gelişmesiyle birlikte kronik Helicobacter gastriti (mide epitelinin bağırsak epiteliyle değiştirilmesi).
4. Gastrik displazi, organ epitelinin anatomik ve fonksiyonel özelliklerinin ihlalidir.
5. Ailede mide kanseri öyküsü, özellikle kanser Bu tanının kanıtlanmış olduğu birinci derece akrabalarda (ebeveyn – çocuklar)
6. Ménétrier hastalığı, mukoza zarının belirgin hipertrofisi ve ardından kist ve adenom oluşumu ile karakterize kronik bir gastrittir. Bu kanser öncesi bir patolojidir, bu nedenle Helicobacter pylori enfeksiyonu açısından dışkıyı ek olarak incelemeye ihtiyaç vardır.
7. Özellikle epigastrik bölgede ağrı ile birlikte altı aydan uzun süredir devam eden fonksiyonel dispepsi.
8. Hazırlık için uzun süreli kullanım steroidal olmayan antiinflamatuar ilaçlar, asetilsalisilik asit.
9. Uzun süre inhibitör kullanmak zorunda kalan hastalarda Proton pompası(yemek borusu hastalıkları için, gastropatinin önlenmesi için).
10. Kan hastalıkları ─ trombositopenik purpura, idiyopatik demir eksikliği anemisi.

1. Yöntem otomatiktir ve araştırma sürecine insan katılımı minimum düzeydedir.
2. Yöntemin teşhis değeri oldukça yüksektir (% 98'e kadar).
3. Modern laboratuvar koşullarında yanlış pozitif sonuç vermez.

Kusurlar:

1. Negatif bir test sonucu vücutta patojenin varlığını dışlamaz.
2. Bakteri türlerinin çeşitliliği nedeniyle test sisteminin çok yönlülüğü sınırlı olabilir.
3. Biyomateryal araştırmalarının sonuçlarının standartlaştırılması zordur. Farklı numuneleri birbirleriyle karşılaştırmak için test malzemesi miktarını eşitlemek neredeyse imkansızdır.
4. PCR sonuçları tanı koymada nihai ve temel olamaz.

Bakteriyolojik kültür

Kültür analizi h. H. pylori enfeksiyonu karmaşık ve emek yoğun bir süreçtir. Yaşayan bir kültür geliştirmek için ihtiyacınız olan Özel durumlar. Kural olarak bu tür çalışmalar araştırma merkezlerinde veya Eğitim Kurumları klinik laboratuvarı bulunmaktadır.

Kültür %100 spesifik bir yöntem değildir. Helicobacter'in geçmesi genellikle mümkün olmadığından ekimi imkansızdır. biyolojik materyal her zaman doğru sonuçlanmaz. Kültürü yapılabilir bir mikroorganizma kolonisi içermeyebilir. Bakteriler ayrıca materyalin toplanması veya taşınmasıyla ilgili kuralların ihlal edilmesi durumunda da ölür.

Bu yüzden Bu method Teşhis amacıyla kullanılması pratik değildir. Bilimsel deneyler için kullanılır.

Dışkı ICA (immünokromatografik analiz)

Bu immünokimyasal bir yöntemdir.
test numunesinin sabit ve hareketli fazlar arasındaki dağılımına ve antikorların antijene seçici bir şekilde bağlanma özelliğine dayanır.

Analiz edilen malzemeyi içeren hareketli faz, sabit faz boyunca hareket eder. Bu durumda, emme (absorbsiyon) ve desorpsiyon (serbest bırakma) eylemleri birçok kez tekrarlanır. Maddenin (bakteri) tanımlanması bu şekilde olur.

Avantajları:

• basitlik ve rahatlık, yöntem pahalı ekipman gerektirmez;
• test güvenilirliği -% 99;
• kullanılabilirlik (ELISA ile karşılaştırıldığında daha ekonomik yöntem).

Tekniğin dezavantajları arasında, analiz sonucunun, test sistemlerinin üretiminde kullanılan monoklonal antikorların kalitesine ve ayrıca biyomateryaldeki her zaman tespit edilemeyen bakteri konsantrasyonuna bağlı olması yer almaktadır.

Malzeme toplama kuralları

Nihai analiz sonuçlarının güvenilir olabilmesi için doğru numune almayı bilmeniz gerekir.

Biyomateryal temiz ve kuru bir kapta toplanır. İdrar veya kan karışımı içermemelidir. En iyi seçenek dışkının sabah laboratuvara teslim edilmeden önce toplanmasıdır. Bu mümkün değilse akşam numunesi alabilirsiniz. Ancak buzdolabında 8°C'yi aşmayan sıcaklıkta en fazla 10 saat saklanmalıdır.

Dışkı bağışlamadan önce, testten 72 saat önce ilaç almayı bırakmalısınız. Peristalsis bozulmuşsa veya kabızlık mevcutsa, yanlış sonucu önlemek için hastaya hafif bir müshil (laktuloz) reçete edilir.

Enfeksiyon tedavisini kontrol etmek h. H. pylori için dışkı analizi, tedavinin bitiminden en geç bir ay sonra yapılır. antibakteriyel tedavi.

Helikobakter pilori

Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR), DNA polimeraz enzimini kullanarak bakteri veya virüslerin DNA kopya sayısını milyonlarca kat artırır. Teşhis için tek bir DNA molekülü yeterlidir. Sentezlenen DNA miktarı yöntemlerle belirlenir enzim immünolojik tahlili veya elektroforez. PCR teşhisi, patojeni en erken aşamalarda tespit etmenizi sağlar bulaşıcı süreç, vücudun herhangi bir biyolojik ortamında, virüs veya bakterilerin kantitatif olarak belirlenmesi olasılığı ile.

Helicobacter pylori, mide mukozasında yarım asırdan fazla bir süre önce keşfedilen sarmal gram-negatif bir bakteridir, ancak organizmaların mukozal biyopsilerden kültürlenmesine yönelik bir yöntemin geliştirildiği 1980'lerin başlarına kadar pek ilgi görmemiştir.

1983 yılında Avustralyalı doktor Barry Marshall, H. pylori'nin kronik gastrit veya ülserden mustarip hastaların midesinde neredeyse her zaman mevcut olduğunu keşfetti. Bakteriler tek başlarına mide veya duodenum ülserine neden olmazlar, ancak ülsere neden olurlar. inflamatuar süreçler midede ve mukoza zarının midenin asidik ortamının etkilerinden doğal korunmasını zayıflatır; H. pylori aynı zamanda hidroklorik asidin aşırı salgılanmasını uyararak düzenleme mekanizmalarını etkiler. Terapi mide asiditesinde bir azalmaya yol açarsa ülser iyileşebilir, ancak tedaviyi bıraktıktan sonra tekrarlama olasılığı vardır. Uzun süreli gözlemler, H. pylori tedavisi almayan hastalarda ülserin 2 yıl sonra %100 oranında tekrarladığını, tedavi gören hastalarda ise (genellikle H. pylori ile yeniden enfeksiyona bağlı olarak) yalnızca 5-10 yılda tekrarladığını göstermiştir. %. H. pylori enfeksiyonunun kaynağı enfekte kişi, kediler, domuzlar, sığırlar ve maymunlar (al yanaklı maymun). Daha sıklıkla enfeksiyon, dışkıyla kirlenmiş su ve yiyecekler (kirli suyla sulanan sebzeler) yoluyla meydana gelir. Bulaşıcı prensibin bulaşma amacı, öksürük sırasında kirlenmiş eller, tükürük, tükürük damlaları veya balgam olabilir. ABD'li doktorların yaptığı araştırmalar, H. pylori'nin ailesel bir enfeksiyon olarak kabul edilebileceğini, bir ailede H. pylori taşıyıcısı tespit edilmesi durumunda diğer aile bireylerinin de enfekte olma olasılığının %95 olduğunu göstermiştir. Helicobacter'in PCR ile tespiti, çok daha hızlı tanı konulmasını ve tedavinin izlenmesini mümkün kılar. Araştırma materyalleri mide aspiratlarını, dışkıyı ve tükürüğü içerebilir.

Ürogenital smear almanın, boğazdan, burundan ve ağızdan smear almanın ücretli olduğunu lütfen unutmayın.

Helicobacter pylori enfeksiyonunu tespit etmeye yönelik yöntemlerin sınıflandırılması tabloda sunulmaktadır.

İnvaziv yöntemler gerektirir endoskopik muayene(FEGDS) biyopsi ve gastrobiyopsi örneklerinin daha ileri incelenmesi ile. İnvaziv olmayan endoskopik muayene yöntemleri gerektirmez.

Histolojik yöntem

Soğutucunun biyopsi örneklerini incelemek için histolojik yöntem - lekeli mikroskopi Farklı yollar(hematoksilen-eozin, Giemsa, toluidin mavisi, Warthin-Starry) gastrobiyopsi yaymaları. Bu yöntem, soğutucunun iltihabının ciddiyetini, atrofi varlığını, bağırsak metaplazisini ve HP varlığını (kontaminasyon derecesini) belirlemenizi sağlar.

Hızlı üreaz testi (Helpil testi)

Hızlı üreaz testi (Helpil testi) - soğutucunun biyopsi örneklerinde bir mikroorganizmanın üreaz aktivitesi ile HP'nin belirlenmesi. Helicobacter pylori, etkisi altında ürenin amonyum iyonu oluşturmak üzere hidrolize edildiği üreaz üretir. Aynı zamanda, göstergenin rengi değiştirilerek kaydedilebilen ortamın pH'ı da artar. Gastrobioptatlar, üre ve renk değişimi dolaylı olarak HP'nin varlığını gösteren bir gösterge içeren bir çözeltiye yerleştirilir.

Moleküler genetik yöntem - biyopsi örneğinde PCR

PCR kullanarak mide biyopsisi örneklerinin incelenmesine yönelik moleküler genetik yöntem, yüksek derecede patojenik ve düşük patojenik HP suşlarının izole edilmesine olanak tanır.

Bakteriyolojik yöntem

Mide mukozasının biyopsi örneklerinin incelenmesi için bakteriyolojik bir yöntem: Birinci basamak tedaviden önce kültürel inceleme ve HP'nin antibiyotiklere duyarlılığının belirlenmesi, klaritromisine karşı yüksek direncin (% 15-20'den fazla) olduğu bölgelerde yapılması önemlidir. bileşenlerinden biri klaritromisin olan standart üç bileşenli yok etme tedavisinin kullanılması planlanmaktadır. İkinci basamak eradikasyon tedavisinin etkisiz olması durumunda, antibiyotiklere duyarlılığın belirlenmesini sağlayan bakteriyolojik bir yöntem de kullanılmalıdır.

HP antijeninin varlığı açısından dışkı muayenesi (ELISA)

Dışkıda HP antijenini tespit etmek için ELISA (özellikle monoklonal antikorlar kullanılarak) oldukça hassastır ve özel yöntem gelince birincil tanı HP enfeksiyonları ve tedavinin sonucunu izlemek.

Serolojik yöntem

Serolojik yöntem (ELISA) - belirleme IgG antikorları kan serumunda HP'ye - basit ve mevcut yöntem enfeksiyon için birincil tarama. HP'ye karşı antikorların, mikroorganizmanın ortadan kaldırılmasından sonra aylarca devam ettiği göz önüne alındığında, yok etme tedavisinin etkinliğini değerlendirmek için serolojik bir yöntemin kullanılması önerilmez.

13C-üre ile üreaz nefes testi

Üreaz nefes testi, karbon izotopu (13C) ile işaretlenmiş bir üre çözeltisi alındıktan sonra dışarı verilen havanın bileşiminin incelenmesidir. Deneğin midesinde HP mevcutsa, bakteri tarafından üretilen üreazın etkisi altındaki üre, NH4+ ve HCO3-'ye hidrolize uğrar, ardından HCO3-'den karbondioksit oluşur ve bu daha sonra kan dolaşımına girer. akciğerlerden salınır ve dışarı verilen havadaki bir spektrometre ile belirlenebilir. Bu test hem HP'nin birincil tanısı hem de ortadan kaldırılmasının etkinliğinin değerlendirilmesi için kullanılabilir.

Helicobacter pylori enfeksiyonunun arka planına karşı, inflamatuar hastalıklar mide veya duodenal ülserler gibi gastrointestinal sistem, Eroziv gastrit, gastroduodenit.

Helicobacter pylori (Helicobacter pylori) bakterisi, insan midesi ve duodenumun mukoza hücrelerinde yaşar. Mikroorganizmanın bazı türleri (genetik türleri), hücreleri yok eden ve aşağıdaki gibi patoloji riskini artıran spesifik toksinler salgılar: Kronik gastrit ve duodenit, mide ve duodenumun peptik ülseri, bazı türleri malign tümörler A. Bu tür suşların derhal tespit edilmesi ve tedavi edilmesi gerekir. Helicobacter pylori enfeksiyonunu belirlemenin bir yolu dışkı testi yapmaktır.

Dışkı analizi kullanarak Helicobacter'i belirleme mekanizması

PCR (polimeraz zincir reaksiyonu), kültürel ve immünolojik dışkı testleri doğrudan araştırma yöntemleridir. Dolaylı yöntemlerin aksine, patolojik bir ajanın varlığı, metabolik ürünlerinin veya reaksiyonunun varlığına göre değerlendirildiğinde bağışıklık sistemi organizma (antikor üretimi), doğrudan yöntemler doğrudan mikroorganizmanın kendisini veya DNA'sını tespit eder.
Helicobacteriosis için her türlü dışkı testi, kan örneklemesi veya gastroduodenoskopinin aksine, invazif olmayan (travmatik olmayan) araştırma türleridir.

Moleküler teşhis

PCR yöntemi, moleküler genetik teşhis türlerinden biridir ve materyalde küçük bir bakteriyel DNA parçası mevcut olsa bile Helicobacter pylori'nin varlığını belirlemenizi sağlar.

Yöntemin özü, analiz edilen patojen örneğini tekrar tekrar çoğaltmaktır. Reaksiyonu gerçekleştirmek için, Helicobacter pylori nükleik asidine benzer DNA parçalarının yapay sentezi yoluyla elde edilen iki primerden oluşan bir tür “çerçeve” gereklidir. Primerler arasındaki reaksiyon sırasında, dışkıda mikroorganizma biyomateryalinin bir parçası mevcutsa DNA zinciri büyür. Eğer yoksa herhangi bir reaksiyon meydana gelmez.

Reaksiyon şu saatte gerçekleştirilir: belirli değerler ortamın sıcaklığı ve asitliği, birkaç düzine tekrarlanan döngüden oluşur; kataliz (reaksiyonun hızlandırılması) için özel bir enzim olan polimeraz kullanılır. 30'dan fazla döngüde, biyomateryalde bulunan patolojik ajanın DNA fragmanı bir milyar kez çarpılır ve bu da enfeksiyonun doğru bir şekilde teşhis edilmesini mümkün kılar.

Uygun primerler mevcutsa sitotoksik (mide mukozasına zarar veren hücreler) Helicobacter pylori türlerinin neden olduğu enfeksiyon tespit edilebilir.

Kültürel analiz

Kültürel analiz (bakteriyolojik kültür) mikrobiyolojik bir araştırma yöntemidir.

Biyolojik materyal, bakteri kolonisinin büyümesine uygun özel bir ortama yerleştirilir. Belirli bir süre sonra (Helicobacter pylori için - bir haftadan fazla), kültür mikroskop altında incelenir ve koloniler kullanılarak doğru şekilde tanımlanır. çeşitli metodlar– renk, belirli biyokimyasal reaksiyonlara girebilme yeteneği.

Yöntem, patolojik antijeni (hastalığın etken maddesi) tanımlamanın yanı sıra, antibakteriyel ilaçlara duyarlılığını test etmenize olanak tanır, bu da tedavinin süresini ve maliyetini azaltır ve tedavinin etkinliğini artırır.

Ne yazık ki, bazı durumlarda, in vitro duyarlılık testinin (“in vitro”) sonuçları, in vivo (canlı bir organizma) tedavinin sonuçlarıyla örtüşmeyebilir: hayatta, seçilen antibiyotikler laboratuvar yöntemi kadar etkili olmayabilir.

İmmünolojik analiz yöntemleri

İmmünolojik yöntemler, antikorların antijene yapışma özelliğine dayanmaktadır. Araştırma için özel etiketli antikorlar analiz edilen örnekle birleştirilir, bunun sonucunda materyalde Helicobacter pylori mevcutsa antijen-antikor kompleksleri oluşur.

Muayene için endikasyonlar

Helicobacter pylori enfeksiyonunun her türlü tanısının avantajları ve dezavantajları vardır. Belirli bir yöntemi kullanmanın tavsiye edilebilirliği, çeşitli faktörlere ve tedavinin aşamalarına bağlıdır. En iyi yolçalışmalar bir gastroenterolog tarafından seçilir.

Dışkı PCR analizi için endikasyonlar:

• ülserler ve duodenum;
• mide mukozasının atrofisi;
• polipler, mide tümörleri;
• gastroözofageal reflü (mide içeriğinin yemek borusuna geri akışı), özofagus ülseri;
• genetik yatkınlık: yakın akrabalarda (ebeveynler, kardeşler) midenin malign tümörleri;

Yürütmenin fizibilitesini değerlendirmek için PCR yöntemini kullanarak bir çalışma yazmak en uygunudur. spesifik tedavi mevcut organik hasar için antibakteriyel ilaçlar.

Kültürel analiz endikasyonları - duyarlılığın belirlenmesi ilaçlar Ampirik tedavi etkisiz ise. Test karmaşık olduğundan (kültür özel bir ortam ve oksijen eksikliği gerektirir) ve uzun süreli olduğundan, bu test bir enfeksiyonu teşhis etmek için önerilmez.

Bakteriyolojik kültür, Helicobacter pylori'nin yalnızca spiral formlarını izole edebilir, ancak son zamanlarda yaygınlaşan kokal formları izole edemez. Bu durum çalışmanın değerini daha da azaltmaktadır.

İmmünolojik yöntemler için endikasyonlar:

• mide ve bağırsakların fonksiyonel ve organik patolojilerinin belirtileri:
  • , geğirme;
  • ilkbahar ve sonbaharda alevlenmelerle gün boyunca periyodik olarak ortaya çıkan ağrı;
  • ishal veya kabızlık;
  • rahatsızlık hissi, midede dolgunluk;
• steroidal olmayan antiinflamatuar ilaçlar veya proton pompa inhibitörleri (hidroklorik asit üretimini azaltan ilaçlar) ile uzun süreli tedavi reçete etmeden önce;
• demir eksikliği anemisi veya etiyolojisi bilinmeyen trombositopeni;
• genetik eğilim;
• yakın çevrenin enfeksiyonu;
• Antibiyotik tedavisinin etkinliğinin izlenmesi.

İmmünolojik yöntemler ve genotipleme olmadan PCR, tarama amacıyla reçete edilir - basitliği ve nispeten düşük maliyeti nedeniyle, çalışma, mide ve bağırsakta organik ve tümör lezyonları geliştirme riski taşıyan grupları belirlemek için genel kamuoyuna yapılır.

Ne yazık ki Rusya'da Helicobacter pylori taraması yaygın değildir.

İmmünolojik analiz daha önce gerçekleştirilir. enstrümantal yöntemler uygun semptomları araştırır ve Helicobacter pylori enfeksiyonunu önerir. Analiz sonuçlarına göre gerekirse başka araştırma yöntemleri de reçete edilir.

Dışkıda PCR analizinin avantajları ve dezavantajları

Helikobakteriyozun antibakteriyel ilaçlarla spesifik tedavisi, birçok hastada zayıf tolere edilebilirlik ve yüksek komplikasyon riski ile birlikte uzun bir süreçtir.

Helicobacter pylori ile enfekte olan herkese antibiyotik reçete etmek kötü bir uygulamadır. Spesifik antibiyotik tedavisi yalnızca organik lezyonların (erozyonlar, ülserler, atrofik süreç) ilerlemesi eğilimi olan ve genellikle Helicobacter'in belirli suşlarıyla enfekte olan hastalar için endikedir. Bu hastalar remisyon sağlamak için antibiyotik tedavisine ihtiyaç duyarlar. ülser ve malign neoplazmların gelişme riskinin önlenmesi.

Helicobacter pylori'nin sitotoksik türleri yalnızca PCR yöntemi kullanılarak tespit edilebilir.

PCR dışkı analizinin avantajları:

• yöntemin yüksek hassasiyeti;
• testin yüksek özgüllüğü;
• materyal toplamanın basitliği ve müdahalesizliği;
• emniyet;
• Helicobacter pylori'nin hem spiral hem de kokkal formlarını izole etme yeteneği;
• Farklı bakteri türlerini izole etme yeteneği.

Test duyarlılığı, gerçek pozitif sonuçlar üretme yeteneğidir. Duyarlılık ne kadar yüksek olursa, antijenin enfekte olmayan bireylerde tespit edildiği iddia edildiğinde yanlış pozitif sonuçların oranı da o kadar düşük olur.

Testin özgüllüğü, yanlış negatif (enfekte bir hastada antijen salınmadığında) test sonuçlarının sayısına bağlı olan bir göstergedir. Helicobacter pylori için dışkıyı test etmeye yönelik PCR yöntemi %64-94 duyarlılık ve %100 özgüllük ile karakterize edilir.

Dışkı toplamak kolay ve basittir. Kan örneklemesi veya gastroduodenoskopiden farklı olarak materyalin toplanması, lokal anestezikler geliştirebilecek alerjik reaksiyon ağrıya veya rahatsızlığa neden olmaz ve "kirli" bir aletle enfeksiyona karşı güvenlidir. Çalışma, küçük çocukların bile erişebilmesini sağlayan nefes alma yöntemi gibi herhangi bir özel çaba gerektirmiyor.

PCR dışkı analizinin dezavantajları:

• antibakteriyel ilaçlara duyarlılığı belirleyememe;
• Bakterinin DNA parçaları yaklaşık bir ay boyunca dışkıda kalabildiğinde, mevcut bir enfeksiyon ile başarıyla tedavi edilmiş bir enfeksiyon arasında ayrım yapamama;
• Daha düşük oran mide mukozasının biyopsisi (doku örneği veya hücre kütlesi) çalışmasına kıyasla hassasiyet;
• genotipleme ile analizin nispeten yüksek maliyeti;
• Personel için katı gereksinimler: nitelikler, kurallara sıkı sıkıya bağlılık, doğruluk.

PCR yönteminin ana dezavantajlarından biri, ana avantajının devamıdır: Testin yüksek hassasiyeti, analiz edilen materyalin kontaminasyonu (dışarıdan kontaminasyon) durumunda yanlış pozitif sonuçlara neden olur.

Teste hazırlanıyor

Herhangi bir analiz sonucunun güvenilirliği, tüm aşamalarda belirli koşulların sıkı bir şekilde yerine getirilmesine bağlıdır ve materyalin örneklenmesi bir istisna değildir.

Materyal alma kuralları:

• Analizden üç gün önce antibiyotikler, laksatifler ve peristaltizmi yavaşlatan ilaçlar kesilir, rektal fitiller ve doktor tarafından reçete edilen diğer bazı ilaçlar, bu nedenle doktoru bazı ilaçların kullanımı konusunda uyarmalısınız;
• Dışkılar laboratuvar tarafından verilen kaplarda toplanır, üç farklı noktadan numune alınması tavsiye edilir;
• Biyomateryalin derhal laboratuvara teslim edilmesi tavsiye edilir; bu mümkün değilse numune 24 saatten fazla olmamak üzere 2–8 derece sıcaklıkta saklanmalıdır;
• Helicobacter pylori'ye karşı önceden reçete edilen antibiyotik tedavisinin etkinliğini değerlendirmek için test yapılırsa, dışkı tedavinin bitiminden en geç dört hafta sonra toplanır.

Dışkı geçişini yavaşlatmak ve kabızlık, dışkıda Helicobacter'in yok olmasına neden olabilir ve bu da yanlış negatif sonuçlara neden olur. Sonucun güvenilirliğini arttırmak için, doktor analizden önce hafif bir müshil - laktuloz - reçete edebilir.

Nasıl ve nerede test yaptırılır

Testler bir gastroenterolog tarafından reçete edilir, bu nedenle Helicobacter pylori testi yapılmadan önce onun konsültasyonu gereklidir.

Dışkı muayenesinin yaklaşık maliyeti:

• Genotiplemeli PCR yöntemi – 1200 ruble;
• Genotipleme olmadan PCR – 600 ruble;
• antibiyotiklere duyarlılık – 600 ruble;
• immünolojik yöntemler – 400–650 ruble (yönteme bağlı olarak).

Helicobacter pylori'nin en doğru teşhisi için iyi bir itibar kazanmış bir tıp kurumunun seçilmesi gerekmektedir.

Araştırma sonuçları

Testlerin işlem süresi ve güvenilirliği antijen belirleme yöntemine bağlıdır.

Helikobakteriyoz için dışkı testlerinin tamamlanma zamanlaması, güvenilirliği ve sonuçlarının yorumlanması.

İmmünolojik ve kültürel analizin düşük güvenilirliği, dışkıdaki düşük antijen içeriği ile açıklanmaktadır: PCR analizi 10 hücre varlığında bile hassassa, o zaman diğer yöntemlerin güvenilir bir sonucu için en az 10 kat daha fazla hücre bulunmalıdır. .

Helibacteriosis için dışkı testi güvenlidir, travmatik değildir ve yapılabilir farklı yöntemler, enfeksiyonu tespit etmeye, virüs suşlarını ve patojenin antibiyotiklere duyarlılığını belirlemeye olanak tanır.

Test sonuçlarına göre, temsilcileri mide ve duodenum ülseri ve malign mide tümörleri geliştirme olasılığı yüksek olan bir risk grubu oluşturmak mümkündür; Riskin derecesini değerlendirin ve zamanında en aza indirin antibakteriyel tedavi helicobacteriosis'in sitotoksik suşları.