Analiza blata na Helicobacter pylori. Testi za Helicobacter: vrste, zanesljivost, priprava in rezultati Kako se imenuje test blata za Helicobacter

Analiza za Helicobacter pylori je predpisana ob prisotnosti simptomov kroničnega gastritisa in želodčnih razjed, saj je ta bakterija povzročitelj teh bolezni. Kaj je to, v katerih primerih je treba opraviti študijo, kako interpretirati rezultate in kako zdraviti okužbo?

Ime mikroorganizma izhaja iz "pylori", kar označuje njegov življenjski prostor (pilorični del želodca), značilnost njegove oblike pa je "heliko", kar pomeni "spiralasto oblikovan".

Testi za Helicobacter

Metod za diagnosticiranje okužbe s HP (okrajšava HP za Helicobacter pylori) je več, različno zanesljive ter se razlikujejo po času in ceni. Katera metoda je hitrejša in cenejša in katera bo bolj natančno pokazala rezultat?

Metode laboratorijska diagnostika Okužbe z bakterijo Helicobacter pylori delimo na invazivne in neinvazivne. Invazivne vključujejo endoskopijo z odvzemom biomateriala (biopsija) in kasnejšim citološkim pregledom.

Med neinvazivnimi preiskavami so najbolj informativne imunološke študije, ki ugotavljajo prisotnost protiteles proti Helicobacter pylori v krvi, antigena H. pylori v blatu, PCR testi, ki odkrijejo genetski material bakterije, in dihalni testi.

PCR

Verižna reakcija s polimerazo (PCR) je molekularna genetska študija, ki omogoča identifikacijo fragmentov DNK povzročitelja helikobakterioze. Kot proučevani biomaterial se uporabljajo fekalne mase. Med analizo se iz biomateriala izolira del bakterijske DNK, ki se nato večkrat podvoji na posebni napravi - ojačevalcu. Ko je količina DNK zadostna za nadaljnjo detekcijo, se ugotovi, ali je v vzorcu genomski fragment, značilen za Helicobacter pylori. Pozitiven rezultat pomeni prisotnost okužbe s Helicobacter pylori. Analiza PCR vam omogoča potrditev prisotnosti tujega mikroorganizma v telesu z natančnostjo 90-95%. Običajno genetski material Helicobacter pylori ni zaznan v testnem materialu.

ELISA

Imunološke metode ne določajo neposredno povzročitelja, ampak odkrijejo protitelesa proti njegovim značilnim antigenom.

Okužba s Helicobacter pylori je povezana s kroničnim gastritisom, želodčnimi razjedami in dvanajstniku, maligni tumorji želodca (adenokarcinom, B-celični limfom).

Glavna metoda testiranja krvi za protitelesa je encimski imunski test (ELISA) - kvantitativno določanje ravni protiteles razredov IgA, IgM in IgG proti Helicobacter pylori. ELISA vam omogoča tudi oceno učinkovitosti zdravljenja okužbe. Da, proizvodnja protitelesa IgM na Helicobacter pylori – marker akutni stadij postopek. Nekaj ​​tednov po začetni okužbi IgM izgine. Ko bolezen napreduje in prehaja v kronična oblika Odkrijejo se protitelesa razreda IgA, nato IgG. Visoka stopnja njihove koncentracije ostanejo v krvi dolgo časa. Občutljivost metode je 87-98%.

Imunobloting

Imunobloting je bistveno slabši od drugih imunoloških metod tako po stroških kot po kompleksnosti izvajanja analize, vendar je le z njegovo pomočjo mogoče pridobiti podatke o lastnostih seva Helicobacter pylori (na podlagi le krvnega seruma bolnika). ali proizvaja specifična antigena CagA in VacA).

Dihalni testi

Dihalni test - določanje produktov hidrolize sečnine z ureazo H. pylori v izdihanem zraku bolnika. Študija temelji na sposobnosti bakterije, da proizvaja hidrolitični encim ureazo. V prebavnem traktu ureaza razgradi sečnino na ogljikov dioksid in amoniaka. Ogljikov dioksid se med dihanjem prenaša v pljuča in sprošča v zrak, njegovo količino pa beleži posebna naprava za analizo ureaze. Dihalni testi za Helicobacter so razdeljeni na ogljik in amoniak.

Mikrobiološke metode

Mikrobiološke in bakteriološke metode se uporabljajo manj pogosto, saj zahtevajo več časa. Vključujejo bakteriološko kulturo blata, izolacijo kulture patogena in določitev njegove občutljivosti na antibiotike. Med študijo se iztrebki postavijo v rastni medij, ugoden za rast kolonij Helicobacter. Po določenem času se kultura pregleda pod mikroskopom, pri čemer se zabeleži število kolonij in njihove lastnosti.

Glavni znaki, ki lahko kažejo na okužbo s Helicobacter pylori, so tipični simptomi bolezni prebavila.

Odločitev o izbiri metode sprejme lečeči zdravnik. Če je bolniku diagnosticirana okužba s HP, je morda priporočljivo pregledati bolnikove družinske člane.

Priprava na analizo

Za odvzem testa Helicobacter ni potrebna posebna priprava, vendar je pomembno slediti splošna pravila, saj le pravilno zbran material zagotavlja zanesljivost rezultata. Praviloma se vsi testi vzamejo na prazen želodec, to je po najmanj osmih urah vzdržanja hrane. Pred študijo se morate izogibati pitju alkohola, kajenju, uživanju mastne in ocvrte hrane. Pri samostojnem zbiranju materiala, na primer za analizo blata, je pomembno preprečiti njegovo kontaminacijo, saj morebitni tuji vključki (npr. detergenti za čiščenje stranišča ali nočne posode) lahko popačijo rezultate.

Pomembno pravilo pri jemanju testov: en mesec pred odvzemom materiala bolnik ne sme jemati antibiotikov ali zdravil, ki spodbujajo gibljivost želodca.

Kako so rezultati dešifrirani

Če je bila opravljena kvalitativna analiza (določanje prisotnosti bakterije Helicobacter v telesu), ima lahko obrazec rezultatov samo dve možnosti - "negativno" ali "pozitivno". Če je metoda analize vključevala kvantitativno oceno, so norme rezultatov odvisne od tehnike, laboratorija, merskih enot in drugih dejavnikov, zato lahko le zdravnik interpretira rezultate analize, postavi končno diagnozo in predpiše zdravljenje.

Helicobacter pylori in njegove značilnosti

Do 70. let prejšnjega stoletja je veljalo, da vse bakterije, ki pridejo v želodec, umrejo pod vplivom klorovodikove kisline, lizocim in imunoglobulin. Leta 1989 je raziskovalcem uspelo v čisti obliki izolirati in gojiti spiralno oblikovan mikroorganizem iz želodčne sluznice bolnika z gastritisom - Bakterija Helicobacter pylori.

Med neinvazivnimi preiskavami so najbolj informativne imunološke študije, ki ugotavljajo prisotnost protiteles proti Helicobacter pylori v krvi, antigena H. pylori v blatu, PCR testi, ki odkrijejo genetski material bakterije, in dihalni testi.

Ime mikroorganizma izhaja iz "pylori", kar označuje njegov življenjski prostor (pilorični del želodca), značilnost njegove oblike pa je "heliko", kar pomeni "spiralasto oblikovan".

Okužba z bakterijo se običajno pojavi pri stiku z umazanimi površinami, s slino, kapljicami v zraku, kot posledica stika z okuženim bolnikom, neupoštevanja pravil osebne higiene, uživanja premalo čiste zelenjave in sadja ali vode iz onesnaženih virov.

Videz klinični simptomi odvisno od stanja imunosti. Med okuženimi ljudmi se pojavi tudi asimptomatsko prenašanje, saj je mikrob sposoben dolgotrajnega parazitiranja brez izrazitega klinične manifestacije in v konfliktu z gostiteljevim imunskim sistemom. V tem primeru bakterija prevzame neaktivno obliko in poveča aktivnost, ko se pojavijo ugodni pogoji. Vendar pa lahko tudi v neaktivnem stanju patogeni mikroorganizem povzroči poškodbe sten želodca in dvanajstnika. Razvijajoče se vnetne spremembe lahko privedejo do atrofije sluznice in razvoja

Test blata za Helicobacter je ena od vrst diagnostike, ki potrdi ali zanika prisotnost bakterij v telesu. Izvaja se tudi za spremljanje zdravljenja. Test blata za Helicobacter pylori je neinvazivna (ne zahteva endoskopije) metoda, ki analizira biomaterial.

Obstajata dva izraza, povezana z diagnozo Helicobacter pylori - "občutljivost" in "specifičnost", na podlagi katerih se naredi zaključek analize.

Občutljivost je sposobnost tehnike, da daje pozitiven rezultat. To določa odstotek odkrite okužbe od skupnega števila opravljenih testov. Ta parameter je precej enostavno izračunati.

Specifičnost ─ je sposobnost diagnosticiranja lažno pozitivni rezultati v odsotnosti bakterij. Ta parameter določa odstotek negativnih odgovorov v skupini zdravih ljudi.

Pomembno! Peptični ulkus želodca in dvanajstnika je absolutni pokazatelj za diagnozo.

V katerih primerih je ta analiza predpisana:

1. Bolezni, povezane z onkološkimi ali predrakavimi. Analiza je pomembna za želodčni limfom, saj zgodnje faze izvaja se le antibakterijsko zdravljenje brez uporabe kemoterapije.
2. Atrofični gastritis.
3. Kronični gastritis Helicobacter z razvojem intestinalne metaplazije (zamenjava želodčnega epitelija s črevesnim epitelijem).
4. Želodčna displazija je kršitev anatomskih in funkcionalnih lastnosti epitelija organa.
5. Zlasti družinska anamneza raka želodca rak pri sorodnikih v prvem kolenu (starši – otroci), pri katerih je ta diagnoza dokazana.
6. Ménétrierjeva bolezen je kronični gastritis, za katerega je značilna izrazita hipertrofija sluznice, ki ji sledi nastanek cist in adenomov. Gre za predrakavo patologijo, zato je potrebna dodatna preiskava blata za okužbo s Helicobacter pylori.
7. Vztrajna funkcionalna dispepsija več kot šest mesecev, zlasti z bolečino v epigastrični regiji.
8. Priprave na dolgotrajna uporaba nesteroidna protivnetna zdravila, acetilsalicilna kislina.
9. Pri bolnikih, ki so prisiljeni dolgo časa uporabljati zaviralec protonska črpalka(pri boleznih požiralnika, za preprečevanje gastropatije).
10. Bolezni krvi ─ trombocitopenična purpura, idiopatska anemija zaradi pomanjkanja železa.

1. Metoda je avtomatizirana, sodelovanje človeka v raziskovalnem procesu pa minimalno.
2. Diagnostična vrednost metode je precej visoka (do 98%).
3. V sodobnih laboratorijskih pogojih ne daje lažno pozitivnih rezultatov.

Napake:

1. Negativen rezultat testa ne izključuje prisotnosti patogena v telesu.
2. Vsestranskost testnega sistema je lahko omejena zaradi različnih bakterijskih sevov.
3. Rezultate raziskav biomateriala je težko standardizirati. Skoraj nemogoče je izenačiti količino testnega materiala za primerjavo različnih vzorcev med seboj.
4. Rezultati PCR ne morejo biti dokončni in temeljni pri postavitvi diagnoze.

Bakteriološka kultura

Analiza kulture h. pylori je zapleten, delovno intenziven proces. Za gojenje žive kulture potrebujete posebni pogoji. Takšne študije se praviloma izvajajo v raziskovalnih centrih oz izobraževalne ustanove s kliničnim laboratorijem.

Kultura ni 100 % specifična metoda. Helicobacter je pogosto nemogoče posejati, ker se lahko prenaša biološki material ne uspe vedno prav. Ne sme vsebovati kolonije mikroorganizma, ki ga je mogoče gojiti. Bakterije umrejo tudi, če so kršena pravila zbiranja materiala ali njegovega prevoza.

Zato ta metoda Uporaba v diagnostične namene ni praktična. Uporablja se za znanstvene poskuse.

ICA blata (imunokromatografska analiza)

To je imunokemična metoda, ki temelji
temelji na porazdelitvi testnega vzorca med stacionarno in mobilno fazo ter na lastnosti protiteles, da se selektivno vežejo na antigen.

Mobilna faza, ki vsebuje analizirani material, se premika skozi stacionarno fazo. V tem primeru se dejanja sorpcije (absorpcije) in desorpcije (sproščanja) večkrat ponovijo. Tako se snov (bakterije) identificira.

Prednosti:

• preprostost in priročnost, metoda ne zahteva drage opreme;
• zanesljivost testa - 99%;
• dostopnost (gospodarnejša metoda v primerjavi z ELISA).

Slabosti tehnike vključujejo dejstvo, da je rezultat analize odvisen od kakovosti monoklonskih protiteles, ki se uporabljajo pri izdelavi testnih sistemov, pa tudi od koncentracije bakterij v biomaterialu, ki je ni vedno mogoče zaznati.

Pravila zbiranja materiala

Da bi bili končni rezultati analize zanesljivi, morate vedeti, kako pravilno vzeti vzorec.

Biomaterial se zbira v čisti, suhi posodi. Ne sme vsebovati primesi urina ali krvi. Najboljša možnost je, če se blato zbere zjutraj, pred dostavo v laboratorij. Če to ni mogoče, lahko vzamete večerni vzorec. Vendar ga ne smemo hraniti več kot 10 ur v hladilniku pri temperaturi, ki ne presega 8 °C.

Pred darovanjem blata morate prenehati jemati zdravila 72 ur pred testom. Če je peristaltika motena ali je prisotno zaprtje, bolniku predpišemo blago odvajalo (laktulozo), da preprečimo napačen rezultat.

Za nadzor zdravljenja okužbe h. pylori, analiza blata se opravi ne prej kot mesec dni po koncu antibakterijska terapija.

Helicobacter pylori

Verižna reakcija s polimerazo (PCR) poveča število kopij DNK bakterij ali virusov za milijonkrat z uporabo encima DNK polimeraze. Za diagnozo je dovolj že ena molekula DNK. Sintetizirano količino DNK identificiramo z metodami encimski imunski test ali elektroforeza. Diagnostika PCR vam omogoča odkrivanje patogena v najzgodnejših fazah infekcijski proces, v poljubnem biološkem okolju telesa, z možnostjo kvantitativnega določanja virusov ali bakterij.

Helicobacter pylori je spiralna gramnegativna bakterija, ki so jo na želodčni sluznici odkrili pred več kot pol stoletja, a je požela veliko zanimanja šele v začetku osemdesetih let, ko so razvili metodo za gojenje organizmov iz biopsij sluznice.

Leta 1983 je avstralski zdravnik Barry Marshall odkril, da je H. pylori skoraj vedno prisoten v želodcu bolnikov s kroničnim gastritisom ali razjedami. Bakterije same po sebi ne povzročajo razjed na želodcu ali dvanajstniku, povzročajo pa vnetni procesi v želodcu in oslabi naravno zaščito sluznice pred učinki kislega okolja želodca; H. pylori hkrati spodbuja hipersekrecijo klorovodikove kisline, kar vpliva na mehanizme njene regulacije. Če terapija povzroči zmanjšanje kislosti želodca, se razjeda lahko zaceli, po prekinitvi zdravljenja pa obstaja možnost ponovitve. Dolgoletna opazovanja so pokazala, da se pri bolnikih, ki niso bili zdravljeni proti H. pylori, razjeda ponovi po 2 letih v 100 %, pri zdravljenih bolnikih pa se ponovi (običajno zaradi ponovne okužbe s H. pylori) le v 5-10. %. Vir okužbe s H. pylori je okužena oseba, mačke, prašiči, govedo in opice (opica rezus). Pogosteje pride do okužbe z vodo in hrano, okuženo z iztrebki (zelenjava, ki je bila zalivana z okuženo vodo). Predmet prenosa nalezljivega principa so lahko kontaminirane roke, slina, kapljice sline ali izpljunek med kašljanjem. Študije, ki so jih izvedli zdravniki iz ZDA, so pokazale, da se H. pylori lahko šteje za družinsko okužbo in če se v družini odkrije nosilec H. pylori, je verjetnost okužbe drugih družinskih članov 95-odstotna. Odkrivanje Helicobacterja s PCR omogoča veliko hitrejšo postavitev diagnoze in spremljanje zdravljenja. Materiali za raziskave so lahko želodčni aspirati, blato in slina.

Upoštevajte, da je odvzem urogenitalnega brisa, brisa žrela, nosu in ustne votline plačljiv.

Razvrstitev metod za odkrivanje okužbe s Helicobacter pylori je predstavljena v tabeli.

Invazivne metode zahtevajo endoskopski pregled(FEGDS) z biopsijo in nadaljnjo študijo vzorcev gastrobiopsije. Neinvazivne metode endoskopskega pregleda ne zahtevajo.

Histološka metoda

Histološka metoda za preučevanje vzorcev biopsije hladilne tekočine - mikroskopija obarvanih različne poti(hematoksilin-eozin, Giemsa, toluidin modro, Warthin-Starry) gastrobiopsijski brisi. Ta metoda vam omogoča, da določite resnost vnetja hladilne tekočine, prisotnost atrofije, črevesne metaplazije in prisotnost (stopnjo kontaminacije) HP.

Hitri ureazni test (Helpil test)

Hitri ureazni test (Helpil test) - določanje HP z ureazno aktivnostjo mikroorganizma v biopsijskih vzorcih hladilne tekočine. Helicobacter pylori proizvaja ureazo, pod vplivom katere se sečnina hidrolizira v amonijev ion. Hkrati se poveča pH medija, kar lahko zabeležimo s spremembo barve indikatorja. Gastrobioptate damo v raztopino, ki vsebuje sečnino in indikator, katerega sprememba barve posredno kaže na prisotnost HP.

Molekularno genetska metoda - PCR v biopsijskem vzorcu

Molekularno-genetska metoda za preučevanje vzorcev želodčne biopsije s PCR omogoča izolacijo visoko patogenih in nizkopatogenih sevov HP.

Bakteriološka metoda

Bakteriološka metoda za preučevanje vzorcev biopsije želodčne sluznice: kulturni pregled in določanje občutljivosti HP na antibiotike pred zdravljenjem prve izbire je pomembno izvesti v regijah z visoko odpornostjo na klaritromicin (več kot 15-20%), če predvidena je uporaba standardne trikomponentne eradikacijske terapije, katere ena od komponent je klaritromicin. Če je druga linija eradikacijske terapije neučinkovita, je treba uporabiti tudi bakteriološko metodo z določanjem občutljivosti na antibiotike.

Preiskava blata na prisotnost antigena HP (ELISA)

ELISA (zlasti z uporabo monoklonskih protiteles) za odkrivanje antigena HP v blatu je zelo občutljiva in posebna metoda kot za primarna diagnoza okužbe s HP, ter za spremljanje izida zdravljenja.

Serološka metoda

Serološka metoda (ELISA) – določanje protitelesa IgG na HP v krvnem serumu - preprosto in razpoložljiva metoda primarni pregled za okužbo. Glede na to, da protitelesa proti HP vztrajajo več mesecev po eradikaciji mikroorganizma, uporaba serološke metode za oceno učinkovitosti eradikacijske terapije ni priporočljiva.

Ureazni dihalni test s 13C-sečnino

Ureazni dihalni test je študija sestave izdihanega zraka po zaužitju raztopine sečnine, označene z izotopom ogljika (13C). Če je HP prisoten v želodcu osebe, se sečnina pod vplivom ureaze, ki jo proizvaja bakterija, hidrolizira v NH4+ in HCO3-, čemur sledi tvorba ogljikovega dioksida iz HCO3-, ki vstopi v krvni obtok. sprošča skozi pljuča in ga lahko določimo s spektrometrom v izdihanem zraku. Ta test se lahko uporablja tako za primarno diagnozo HP kot za oceno učinkovitosti eradikacije.

V ozadju okužbe s Helicobacter pylori, npr vnetne bolezni prebavila, kot so razjede na želodcu ali dvanajstniku, erozivni gastritis, gastroduodenitis.

Bakterija Helicobacter pylori (Helicobacter pylori) živi v celicah sluznice človeškega želodca in dvanajstnika. Nekateri sevi (genetski tipi) mikroorganizma izločajo specifične toksine, ki uničujejo celice in povečujejo tveganje za patologije, kot je npr. kronični gastritis in duodenitis, peptični ulkus želodca in dvanajstnika, nekatere vrste maligni tumorji A. Takšne seve je treba prepoznati in nemudoma zdraviti. Eden od načinov za odkrivanje okužbe s Helicobacter pylori je izvedba testa blata.

Mehanizem za določanje Helicobacter z analizo blata

PCR (verižna reakcija s polimerazo), kulturni in imunološki testi blata so neposredne raziskovalne metode. V nasprotju s posrednimi metodami, ko se prisotnost patološkega povzročitelja ocenjuje po prisotnosti njegovih presnovnih produktov ali reakcije. imunski sistem organizem (tvorba protiteles), neposredne metode neposredno zaznajo sam mikroorganizem oziroma njegovo DNK.
Vse vrste testov blata za helikobakteriozo so neinvazivne (netravmatične) vrste raziskav, za razliko od vzorčenja krvi ali gastroduodenoskopije.

Molekularna diagnostika

Metoda PCR je ena od vrst molekularne genetske diagnostike in vam omogoča, da ugotovite prisotnost Helicobacter pylori, tudi če je v materialu prisoten majhen fragment bakterijske DNA.

Bistvo metode je večkratno razmnoževanje analiziranega vzorca povzročitelja. Za izvedbo reakcije je potreben nekakšen "okvir", sestavljen iz dveh primerjev - pridobljenih z umetno sintezo fragmentov DNA, identičnih nukleinski kislini Helicobacter pylori. Med reakcijo med primerji se veriga DNK poveča, če je v blatu prisoten delček biomateriala mikroorganizma. Če je odsoten, ne pride do reakcije.

Reakcija poteka pri določene vrednosti temperaturo in kislostjo okolja, je sestavljen iz več deset ponavljajočih se ciklov, za katalizo (pospešitev reakcije) pa se uporablja poseben encim polimeraza. V 30 ciklih se fragment DNK patološkega povzročitelja, prisotnega v biomaterialu, pomnoži milijardokrat, kar omogoča natančno diagnosticiranje okužbe.

Če so na voljo ustrezni primerji, je mogoče odkriti okužbo s citotoksično (poškodujejo celice želodčne sluznice) vrsto Helicobacter pylori.

Kulturna analiza

Kulturna analiza (bakteriološka kultura) je mikrobiološka raziskovalna metoda.

Biološki material postavimo v specifično okolje, ki je ugodno za rast bakterijske kolonije. Po določenem času (za Helicobacter pylori - več kot en teden) kulturo pregledamo pod mikroskopom, pri čemer uporabimo kolonije za pravilno identifikacijo različne metode– barva, sposobnost vstopa v določene biokemične reakcije.

Poleg identifikacije patološkega antigena (povzročitelja bolezni) metoda omogoča testiranje njegove občutljivosti na antibakterijska zdravila, kar skrajša čas in stroške zdravljenja ter poveča učinkovitost terapije.

Na žalost v nekaterih primerih rezultati testa občutljivosti in vitro (»in vitro«) morda ne sovpadajo z rezultati zdravljenja in vivo (živ organizem): v življenju izbrani antibiotiki laboratorijska metoda, morda ne bodo tako učinkoviti.

Imunološke metode analize

Imunološke metode temeljijo na lastnosti protiteles, da se držijo antigena. Za raziskave se protitelesa s posebnimi oznakami kombinirajo z vzorcem, ki se analizira, posledično, če je v materialu prisotna Helicobacter pylori, nastanejo kompleksi antigen-protitelesa.

Indikacije za pregled

Vse vrste diagnoze okužbe s Helicobacter pylori imajo svoje prednosti in slabosti. Priporočljivost uporabe določene metode je odvisna od različnih dejavnikov in stopenj zdravljenja. Najboljši načinštudije izbere gastroenterolog.

Indikacije za PCR analizo blata:

• razjede in dvanajstnik;
• atrofija želodčne sluznice;
• polipi, želodčni tumorji;
• gastroezofagealni refluks (refluks želodčne vsebine v požiralnik), razjeda požiralnika;
• genetska predispozicija: maligni tumorji želodca pri bližnjih sorodnikih (starši, bratje in sestre);

Za oceno izvedljivosti izvedbe je optimalno predpisati študijo z metodo PCR specifično zdravljenje antibakterijska zdravila za obstoječe organske poškodbe.

Indikacije za kulturno analizo - določanje občutljivosti na zdravilače je empirično zdravljenje neučinkovito. Ker je test kompleksen (kultura zahteva posebno okolje in pomanjkanje kisika) in dolgotrajen, ta test ni predpisan za ugotavljanje okužbe.

Bakteriološka kultura lahko izolira samo spiralne oblike Helicobacter pylori, ne pa tudi kokalne oblike, ki so v zadnjem času postale zelo razširjene. To dejstvo dodatno zmanjšuje vrednost študije.

Indikacije za imunološke metode:

• simptomi funkcionalnih in organskih patologij želodca in črevesja:
  • , riganje;
  • bolečina, ki se občasno pojavlja čez dan z poslabšanji spomladi in jeseni;
  • driska ali zaprtje;
  • občutek nelagodja, polnosti želodca;
• pred predpisovanjem dolgotrajnega zdravljenja z nesteroidnimi protivnetnimi zdravili ali zaviralci protonske črpalke (zdravila za zmanjšanje nastajanja klorovodikove kisline);
• anemija zaradi pomanjkanja železa ali trombocitopenija neznane etiologije;
• genetska predispozicija;
• okužba neposrednega okolja;
• spremljanje učinkovitosti antibiotične terapije.

Za presejalne namene so predpisane imunološke metode in PCR brez genotipizacije - zaradi svoje enostavnosti in relativno nizkih stroškov se študija izvaja za splošno javnost, da se identificirajo skupine s tveganjem za razvoj organskih in tumorskih lezij želodca in črevesja.

Na žalost presejalni test za Helicobacter pylori v Rusiji ni razširjen.

Pred tem se opravi imunološka analiza instrumentalne metodeštudije z ustreznimi simptomi in nakazuje okužbo s Helicobacter pylori. Na podlagi rezultatov analize so po potrebi predpisane druge raziskovalne metode.

Prednosti in slabosti PCR analize blata

Specifična terapija helikobakterioze z antibakterijskimi zdravili je dolgotrajen proces, ki ga pri mnogih bolnikih spremlja slabo prenašanje in veliko tveganje za zaplete.

Predpisovanje antibiotikov vsem, ki so okuženi s Helicobacter pylori, je slaba praksa. Specifična antibiotična terapija je indicirana samo za bolnike, ki so nagnjeni k napredovanju organskih lezij - erozij, razjed, atrofičnih procesov - običajno okuženih z določenimi sevi Helicobacter. Ti bolniki potrebujejo antibiotično terapijo, da dosežejo remisijo peptični ulkus in preprečevanje tveganja za nastanek malignih novotvorb.

Citotoksične vrste Helicobacter pylori je mogoče odkriti le z metodo PCR.

Prednosti PCR analize blata:

• visoka občutljivost metode;
• visoka specifičnost testa;
• enostavnost in neinvazivnost zbiranja materiala;
• varnost;
• sposobnost izolacije spiralnih in kokalnih oblik Helicobacter pylori;
• sposobnost izolacije različnih sevov bakterij.

Občutljivost testa je zmožnost proizvajanja resnično pozitivnih rezultatov. Večja kot je občutljivost, manjši je delež lažno pozitivnih rezultatov, ko naj bi antigen odkrili pri neokuženih osebah.

Specifičnost testa je pokazatelj, ki je odvisen od števila lažno negativnih (ko se antigen pri okuženem bolniku ne sprošča) rezultatov testa. Metoda PCR za testiranje blata na Helicobacter pylori ima občutljivost 64–94 % in 100 % specifičnost.

Zbiranje iztrebkov je enostavno in preprosto. Za razliko od odvzema krvi ali gastroduodenoskopije zbiranje materiala ne zahteva uporabe lokalni anestetiki, ki se lahko razvije alergijska reakcija, ne povzroča bolečine ali neugodja in je varen pred okužbo z "umazanim" instrumentom. Študija ne zahteva posebnega napora, kot je dihalna metoda, zaradi česar je dostopna tudi majhnim otrokom.

Slabosti PCR analize blata:

• nezmožnost določitve občutljivosti na antibakterijska zdravila;
• nezmožnost razlikovanja med trenutno okužbo in uspešno ozdravljeno, ko lahko fragmenti DNK bakterije ostanejo v blatu približno mesec dni;
• več nizka stopnja občutljivost v primerjavi s študijo biopsije (vzorca tkiva ali celične mase) želodčne sluznice;
• relativno visoki stroški analize z genotipizacijo;
• stroge zahteve za osebje: kvalifikacije, dosledno upoštevanje pravil, natančnost.

Ena od glavnih pomanjkljivosti metode PCR je nadaljevanje njene glavne prednosti: visoka občutljivost testa povzroči lažno pozitivne rezultate v primeru kontaminacije (»kontaminacije« od zunaj) analiziranega materiala.

Priprave na test

Zanesljivost rezultata katere koli analize je odvisna od strogega izpolnjevanja določenih pogojev v vseh fazah in vzorčenje materiala ni izjema.

Pravila za odvzem materiala:

• tri dni pred analizo se ukinejo antibiotiki, odvajala in zdravila, ki upočasnjujejo peristaltiko; rektalne supozitorije in nekatera druga zdravila, ki jih predpiše zdravnik, zato morate zdravnika opozoriti na uporabo nekaterih zdravil;
• Iztrebke zbiramo v posodah, ki jih izda laboratorij, priporočljivo je jemati vzorce iz treh različnih mest;
• Priporočljivo je, da biomaterial takoj dostavite v laboratorij; če to ni mogoče, vzorec hranimo pri temperaturi 2–8 stopinj največ 24 ur;
• če se test izvaja za oceno učinkovitosti predhodno predpisane antibiotične terapije proti Helicobacter pylori, se blato odvzame ne prej kot štiri tedne po koncu zdravljenja.

Upočasnjeno odvajanje blata in zaprtje lahko privedeta do uničenja bakterije Helicobacter v blatu, kar povzroči lažno negativne rezultate. Za večjo zanesljivost rezultata lahko zdravnik pred analizo predpiše blago odvajalo - laktulozo.

Kako in kje se testirati

Teste predpisuje gastroenterolog, zato je pred testiranjem na Helicobacter pylori potrebno njegovo posvetovanje.

Približni stroški pregleda blata:

• Metoda PCR z genotipizacijo - 1200 rubljev;
• PCR brez genotipizacije - 600 rubljev;
• občutljivost na antibiotike - 600 rubljev;
• imunološke metode - 400-650 rubljev (odvisno od metode).

Za najbolj natančno diagnozo Helicobacter pylori je treba izbrati zdravstveno ustanovo, ki si je prislužila dober ugled.

Rezultati raziskav

Čas obdelave testov in njihova zanesljivost sta odvisna od metode določanja antigena.

Čas dokončanja, zanesljivost in interpretacija rezultatov testov blata za helikobakteriozo.

Nizko zanesljivost imunološke in kulturne analize je razloženo z nizko vsebnostjo antigena v blatu: če je analiza PCR občutljiva tudi v prisotnosti 10 celic, mora biti za zanesljiv rezultat drugih metod vsaj 10-krat več celic. .

Testiranje blata na helibakteriozo je varno, netravmatično in ga je mogoče izvesti različne metode, ki omogoča odkrivanje okužbe, določanje virusnih sevov in občutljivost patogena na antibiotike.

Na podlagi rezultatov testov je mogoče oblikovati rizično skupino, katere predstavniki imajo visoko verjetnost razvoja razjed na želodcu in dvanajstniku ter malignih tumorjev želodca; oceniti stopnjo tveganja in ga pravočasno zmanjšati antibakterijsko zdravljenje citotoksični sevi helikobakterioze.