Tema 4. Uporaba laboratorijskih živali v diagnostičnih študijah. Nameni uporabe laboratorijskih živali v virologiji

Naloga za naslednjo lekcijo

Povzetek lekcije

Naloge

1. V preparatih pod svetlobnim mikroskopom poiščite in skicirajte:

a) citoplazemska inkluzijska telesca;

b) intranuklearna inkluzijska telesca;

c) virioni virusa črnih koz, obarvani po Morozovu.

2. Seznanite se z zgradbo in principom delovanja elektronskega mikroskopa.

3. Dešifrirajte elektronske mikrofotografije virionov različnih virusov (podajte njihovo shematsko risbo).

Samostojno delo študentov

Učenci se seznanijo z zgradbo svetlobnega, fluorescenčnega in elektronskega mikroskopa (v laboratoriju), skicirajo shemo zgradbe elektronskega mikroskopa. Seznani se s pripravo preparatov za elektronsko mikroskopijo. Oglejte si končni pripravek v fluorescentnem mikroskopu. Narišite diagram neposredne in posredne metode RIF.

Kontrolna vprašanja:

1. Zgradba elektronskega mikroskopa.

2. Metode priprave preparatov za ogled v elektronskem mikroskopu.

3. Direktne in indirektne metode luminescenčne mikroskopije (RIF).

4. Pomen elektronske in fluorescenčne mikroskopije v viroloških študijah.

Namen lekcije: seznani študente z zahtevami za vrste laboratorijskih živali, njihovo karanteno, vzdrževanje, hranjenje, označevanje.

Oprema in materiali: komplet pripomočkov v sterilizatorju (škarje, igle, brizge, pincete, klešče), laboratorijske živali, alkoholne palčke, barve za označevanje, eter, ksilen, multimedijska oprema, plakati in predstavitve MS Office Power Point na temo lekcije.

Učiteljeva razlaga: Večino virusov različnih taksonomskih skupin lahko ločimo med seboj na podlagi patogenosti pri laboratorijskih živalih različni tipi ali starost.

4.1 Vrste laboratorijskih živali. V viroloških laboratorijih se najpogosteje uporabljajo miši, bele podgane, zajci, morski prašički, hrčki in kokoši. Influenca, alfa in flavivirusne okužbe, slinavka in parkljevka (na novorojenih miših) itd. so eksperimentalno reproducirane na mladih miših. Dovzetne so za številne viruse, jih je enostavno gojiti in z njimi je priročno delati. Bolje je uporabiti miši samooplodnih sevov, saj skoraj enako reagirajo na določen virus. Inbred sevi se ustvarjajo tudi pri podganah, vendar so te živali bolj odporne na določene virusne okužbe kot miši. Onkogenost nekaterih virusov je bila obsežno raziskana na zlatih hrčkih. Za virološke poskuse se običajno uporabljajo gladkodlaki morski prašički, ki tehtajo 250–300 g.

Določeno okužbo včasih proučujejo pri živalih več vrst, ki so različno dovzetne za določen virus, kar omogoča razlikovanje med virusi, ki povzročajo klinično podobne simptome bolezni (na primer slinavka in parkljevka, vezikularni stomatitis, vezikularni eksantem in prašičji vezikularna bolezen).

Glede na genetske lastnosti so laboratorijske živali razdeljene v štiri skupine:

1) živali mešanega izvora, pridobljene od različnih rejcev živine, takšne živali so heterogene;

2) živali, pridobljene neposredno iz enega vira, vendar so te živali genetsko spremenljive;

3) samooplodne linije živali. Pridobljeni so s parjenjem brata in sestre ali staršev in otrok v vsaj 20 generacijah. S to metodo vzreje se dosega vedno večja stopnja homozigotnosti.

4) homogeni hibridi F 1. Visoka stopnja heterozigotnost, značilna za vsak hibrid, je tukaj povezana z genetsko enotnostjo, ki ustreza stopnji homozigotnosti starševskih linij. Praviloma so homogeni F 1 hibridi manj variabilni kot obe starševski liniji. Mutirane živali imajo ločeno izraženo dedni faktor, kar povzroči vidno odstopanje od normalne oblike.

Negativna stran izolacije virusa pri laboratorijskih živalih je možnost diagnostičnih napak zaradi aktivacije latentnega prenašanja virusa. V tem primeru razvoj simptomov bolezni po vnosu materiala ni posledica delovanja vnesenega virusa, temveč rezultat samega posega, ki poruši prejšnje ravnovesje v telesu. V tem času se pojavi virus ali drug povzročitelj okužbe, ki ostane v telesu dolgo časa. To se izraža z ostrimi nevrološkimi simptomi (obrati vzdolž dolge osi telesa).

Prisotnost skritega virusna infekcija se lahko izrazi tudi z zmanjšanjem ali izginotjem občutljivosti živali na proučevani virus zaradi pojava interference. Možen je tudi nasprotni učinek, in sicer pojav sinergizma pri delovanju virusov, ki včasih daje rezultate, ki jih je težko pravilno interpretirati.

Za nekatera virološka dela, na primer pri izolaciji virusa z neznanimi patogenimi lastnostmi, je treba uporabiti gnotobiote. Izraz "gnotobioti" združuje dve kategoriji živali: brezklicne (sterilne), ki ne vsebujejo nobenih živih mikrobov, in gnotofore - nosilce enega (monognotofore), dveh (dignotofore) ali več (polignotofore) mikroorganizmov. Trenutno so živali brez klic razdeljene v tri skupine glede na dinamiko rasti: I - opice, pujski, piščanci rastejo bolje kot navadne živali ali enakovredno z njimi; II – podgane, miši, psi, mačke rastejo enako kot običajne živali; III – morski prašički, zajci, kozlički, jagnjeta rastejo slabše od navadnih živali.

Sterilne ptice so proizvedene z inkubacijo jajc s sterilnimi lupinami v sterilnem inkubatorju; laboratorijske živali so proizvedene s carskim rezom ali histerektomijo. Živali so v sterilnih izolatorjih. Zrak, voda in hrana morajo biti sterilni.

Posebej pomembne med gnotobioti so SPF živali (Specific pathogen free), ki so proste samo patogenih mikroorganizmov. Njihovo telo vsebuje vse bakterije in viruse, potrebne za normalno življenje, ki skupaj tvorijo skupino tako imenovane rezidenčne (koristne) mikroflore. Trenutno so pridobljene laboratorijske SPF živali - podgane, morski prašički, zajci, pujski, ptice itd.

4.2 Nameni uporabe laboratorijskih živali. Trenutno se laboratorijske živali uporabljajo v virologiji za:

– odkrivanje virusa v patološkem materialu;

– primarna izolacija virusa iz patološkega materiala;

– kopičenje virusne mase;

– vzdrževanje virusa v laboratoriju v aktivno stanje;

– titracija virusa;

– pridobivanje hiperimunskih serumov;

– kot testni objekt v reakciji nevtralizacije.

V virologiji se uporabljajo zajci, morski prašički, bele podgane, bele miši in zlati hrčki. Vendar pa je le nekatere viruse mogoče gojiti v živalih navedenih vrst. V mnogih primerih se za iste namene uporabljajo tudi druge živali, občutljive na ta virus: kokoši, golobi, mladiči, mladiči itd. Tako se pri diagnosticiranju kokošjih koz uporablja biološki test na piščancih, ovčjih koz na ovcah, prašičje kuge na mladicah.

4.3 Zahteve za laboratorijske živali. Pri pridobivanju skupine živali za virološke raziskave morajo biti izpolnjene naslednje zahteve:

– žival mora biti občutljiva na ta virus;

- njegova starost je pomembna velik pomen za gojenje številnih virusov. Večina virusov se bolje razmnožuje v telesu mladih in celo novorojenih živali. Na primer, sesalne miši se uporabljajo za biološko testiranje na steklino in slinavko in parkljevko, kokoši pa se uporabljajo za ptičji laringotraheitis. Toda hkrati okužba odraslih kuncev z virusom bolezni Aujeszkega povzroči pojav svetlih in specifičnih kliničnih znakov bolezni;

– standardna občutljivost se doseže z izbiro živali določene starosti in enake teže;

– laboratorijske živali morajo biti zdrave. Živali, ki vstopajo v vivarij virološkega laboratorija, morajo biti pripeljane iz kmetije, ki ni okužena s kužnimi boleznimi. Zadržujejo jih v izolaciji, to je v karanteni (bele miši in podgane 14 dni, ostale živali pa 21 dni). V tem obdobju so živali vsakodnevno klinično opazovane. Če obstaja sum na prisotnost nalezljive bolezni, se živali podvržejo laboratorijske raziskave. Če se pri živalih odkrije nalezljiva bolezen, se uniči celotna prispela serija.

4.4 Vzdrževanje laboratorijskih živali. Vivarij za laboratorijske živali mora imeti glavni prostor za živali, umivalnico (z boksom, sušilno in sterilizacijsko enoto), kuhinjo za pripravo hrane z vsaj eno mizo, opremljeno za pripravo hrane in hladilnikom za hitro pokvarljiva živila, shrambo, operacijska soba, garderoba in sanitarni prostor za strežno osebje. Prostori morajo biti čisti. Stene in tla je enostavno razkužiti. Zaloge krme je treba hraniti v posebnih prostorih. V prostorih, kjer so poskusne živali, je priporočljivo imeti higrometer in termometer.

V poskusnem obdobju je priporočljivo imeti miši, podgane, hrčke in morske prašičke v steklenih kozarcih s pokrovom iz žične mreže ali perforirane pločevine. Tako jih je lažje spremljati, kozarce pa je enostavno očistiti in razkužiti. Živali lahko držite v kovinskih kletkah, ki jih je tudi enostavno razkužiti.

Za stelje se uporabljajo materiali, ki vpijajo vlago in jih lahko živali uporabijo za gradnjo gnezda: oblanci za miši, podgane, hrčke, morske prašičke, dihurje, kokoši; žagovina za velike miši, podgane, hrčke, dihurje, piščance; slama za hrčke, morske prašičke, zajce, pse, piščance; pleve za miši, podgane; seno za miši, podgane, hrčke, dihurje, kokoši; pesek za piščance Uporabljajte posteljnino, ki ustvarja čim manj prahu, saj lahko slednji povzroči bolezni dihal. Morebitno steljo je treba najprej 30 minut sterilizirati pri 100 °C.

Prostori za laboratorijske živali se občasno razkužijo, zlasti pred namestitvijo nove serije živali. To velja tudi za pripomočke za nego živali (lopate, strgala, metle ipd.), ki prihajajo v stik z gnojem in raznimi odpadki iz prostorov. Po vsakem poskusu je treba celice obdelati z razkužilnimi raztopinami, pred tem pa očistiti tako celice kot prostor.

Posodo za hrano in vodo dnevno navlažimo z razkužilom, nato operemo in speremo čisto vodo. Prostore obdelamo z 1% raztopino natrijevega hidroksida, ki se uporablja čez dan. Dezinfekcijske podloge vsaka 2 dni impregniramo s svežo raztopino. Za dezinfekcijo predmetov za nego, pomivanje tal in posode je priporočljivo uporabiti 3% raztopino kloramina, ki jo je treba uporabiti v 2 urah. V vivariju je potrebno uničiti škodljivce: muhe, komarje, bolhe, ušijedce, klope. , uši, mravlje, miši, podgane.

Laboratorijske živali so nameščene tako, da je na eni strani zagotovljeno delovanje vseh telesnih sistemov v okviru fizioloških norm, na drugi strani pa je izključena medsebojna ponovna okužba in širjenje okužbe izven vivarija. Živali so v vivariju ob upoštevanju njihovih fizioloških potreb po svetlobi in temperaturi. Tako miši in podgane potrebujejo somrak in temperaturo zraka približno 20 ° C, morski prašički, zajci in piščanci potrebujejo dnevno svetlobo in temperaturo v območju 16–23, 14–18 in ne nižjo od 0 ° C. Gostota naselitve mora biti približno 1 g mase laboratorijskih živali na 1 cm 2 dna kletke. Živalim je zagotovljeno redno in hranljivo hranjenje ter stalno pitna voda.

Če je samo en vivarij, se okužene živali izolirajo od zdravih, pri slednjih pa se začne čiščenje prostora in hranjenje. Za oskrbo okuženih živali se uporablja ločena oprema in krmilniki. Bolje je imeti dva vivarija: za vzdrževanje zdravih in okuženih živali.

Pri delu v vivariju vzdrževalci uporabljajo posebna oblačila: haljo, gumijaste rokavice, predpasnik in nepremočljive čevlje. V vivariju se oprema dnevno razkužuje in mokro čiščenje izvaja z razkužili. Na koncu poskusa celice razkužimo, mrtve živali nevtraliziramo s sežiganjem v pečeh ali avtoklaviranjem.

V poskusno skupino so izbrane živali z enako težo, temperaturo, sestavo krvi itd. Od tega je v veliki meri odvisna uspešnost izolacije virusa, titracije in pasaže. V tem primeru se upošteva dovzetnost živali za različne viruse. Izbrane živali označimo, razdelimo v banke ali kletke, zabeležimo datum poskusa, njegovo število, kužni ali profilaktični odmerek zdravila in po potrebi način označevanja živali. Slednje je pomembno, kadar so v enem kozarcu ali kletki živali iz več skupin.

Tabela 1

Masa živali različnih starosti

RD-APK 3.10.07.02-09

MINISTRSTVO ZA KMETIJSTVO
RUSKA FEDERACIJA

Moskva 2009

Razvil: dr. kmetijski znanosti, umetnost. znanstveni sodelavci P.N. Vinogradov, dr. tehn. znanosti S.S. Ševčenko, O.L. Sedov, E.S. Garafutdinova, M.F. Malygin (NPC "Giproniselkhoz"); Dr vet. znanosti, prof. V.G. Tjurin (GNU VNIIVSGE)

PREDSTAVLJENO: SPC "Giproniselkhoz".

POTRDI IN UVELJAVLJA: namestnik ministra Kmetijstvo Ruska federacija A.I. Belyaev 1. december 2009

PRVIČ RAZVIT.

Datum uvedbe: 15.12.2009

1. Splošne določbe

1.1. Te smernice veljajo za vse raziskovalne organizacije in izobraževalne ustanove ruskega kmetijsko-industrijskega kompleksa, ne glede na njihovo organizacijsko in pravno obliko, ki pri svojem delu uporabljajo laboratorijske (poskusne, poskusne) živali.

V skladu z zveznim zakonom "O tehničnih predpisih" (sprejet Državna duma 15. decembra 2002 in potrdil Svet federacije 18. decembra 2002) do sprejetja ustreznih predpisov se tehnični predpisi na področju veterinarskih in sanitarnih ukrepov izvajajo v skladu z zakonom Ruska federacija"O veterinarski medicini" (odobreno 14. maja 1993, št. 4979-1).

1.2. Metodološka priporočila veljajo tako za novo zasnovane prostore za zadrževanje in delo z laboratorijskimi živalmi - eksperimentalne biološke klinike, vivarije itd., Kot tudi za obstoječe in rekonstruirane.

1.3. Objekti za zadrževanje in delo z laboratorijskimi živalmi so znanstvene in pomožne enote raziskovalnih organizacij, izobraževalne ustanove in so ustvarjeni za vzdrževanje in po potrebi za vzrejo laboratorijskih živali, ki se uporabljajo pri poskusnem delu in raziskavah. Na teh objektih se lahko izvaja tudi samostojen razvoj posameznih znanstvenih vprašanj.

1.4. Standardi in zahteve za načrtovanje, gradnjo in delovanje objektov za rejo laboratorijskih živali, določeni v teh smernicah, so namenjeni zagotavljanju varnosti osebja, ki dela z živalmi, in prebivalstva kot celote pred pojavom antroposavnoz in drugih bolezni.

1.5. Razvoj, usklajevanje, odobritev in sestava projektne dokumentacije za gradnjo objektov za zadrževanje laboratorijskih živali se izvajajo v skladu z zahtevami SNiP 11.01-2003.

1.6. Objekt za zadrževanje laboratorijskih živali (v nadaljnjem besedilu: vivarij) se nahaja v ločeni stavbi (gradbeni kompleks) ali v zgornjih nadstropjih laboratorijskih zgradb veterinarskih državnih znanstvenih ustanov, pa tudi na ozemlju izobraževalnih ustanov.

1.7. Vivariji morajo biti opremljeni s pitno vodo, vključno s toplo vodo, elektriko, opremljeni s kanalizacijo (cevi s premerom najmanj 100 mm), dovodnim in izpušnim prezračevanjem, ogrevanjem, varnostnimi in požarnimi alarmi ter imeti priročne dostopne ceste.

1.8. Razdalja med ločeno stavbo vivarija in zgradbami raziskovalnih ustanov, ki vključujejo pravi vivarij, ne sme biti manjša od razdalje požarnih prelomov, ki jih določajo veljavna pravila požarne varnosti v Ruski federaciji.

1.9. Posamezne stavbe vivarija morajo biti ograjene s trdno ograjo in ločene od stanovanjskega območja s sanitarno varovalnim pasom. Območje naj bo urejeno.

Mere sanitarno zaščitnega območja so določene z zahtevami SaNPiN 2.2.1 / 2.1.1.1200-03.

1.10. Mere sanitarno zaščitnega območja za vivarije, ki se nahajajo v ločenih upravnih in industrijskih stavbah in imajo izoliran izhod, se za vsak primer posebej dogovorijo z državnimi sanitarnimi in veterinarskimi nadzornimi organi.

2. Sestava, relativni položaj in standardi površin za prostore vivarija

2.1. Vsak vivarij mora vključevati prostore, zasnovane v skladu z veljavnimi gradbenimi predpisi in predpisi v skladu z veljavnimi veterinarskimi in sanitarnimi zahtevami ter zoohigienskimi standardi, vključno z:

soba za osebje z individualnimi omaricami za delovna oblačila;

prostori za sprejem in karanteno živali, ki na novo prispejo v vivarij;

izolator;

prostori za zadrževanje poskusnih živali (ločeni za vsako vrsto) ali (v soglasju z državnimi veterinarsko-sanitarnimi nadzornimi organi) razdeljeni na oddelke po vrstah živali;

sterilizacijski prostor ali boks za raziskovalce za delo z neokuženimi živalmi, s prostorom za obdukcijo živali in hladilnikom za začasno hrambo trupel;

izolirani prostori za zadrževanje poskusnih živali, okuženih s kulturami povzročiteljev posebej nevarnih okužb ali radioaktivnih snovi (ločeno) z operacijsko sobo v vsaki izolirani sobi, ki ima hladilnik in potrebno opremo za okužbo in disekcijo živali;

krmna kuhinja za pripravo krme (mora biti opremljena s štedilnikom in hladilnikom);

dezinfekcijski in pralni predel za pranje topla voda, dezinfekcija in sušenje kletk in druge opreme;

skladišče čiste (razkužene) rezervne opreme: kletke, pojilniki itd.;

sanitarni blok (tuš in WC);

prostor, opremljen s pečjo za sežiganje živalskih trupel;

splošna hladilna komora za shranjevanje živalskih trupel;

skladišče krme;

skladiščenje smeti;

v ločenem prostoru ali v samostojnem objektu - tehnična enota za klimatizacijo, prezračevanje, električne in druge posebne inštalacije.

2.2. Vsak vivarij mora imeti prostor za sprejem prihajajočih živali. V vivarijih, kjer se zadržujejo majhni glodavci, je pred sprejemnim oddelkom nameščen izoliran predprostor, v katerega vstopi in raztovori vozilo s prispelimi živalmi.

Kadar se vivarij nahaja v zgornjih nadstropjih laboratorijskih zgradb, se sprejemni oddelek in izoliran predprostor nahajata v prvem nadstropju laboratorijske zgradbe in sta z vivarijem povezana z dvigalom, ki se uporablja samo za dvigovanje laboratorijskih živali.

2.3. Sprejemna soba je prostor s površino 12,5 - 18 m2 z naravno in umetno razsvetljavo v skladu z zahtevami.

Višina vseh prostorov vivarija je 3 - 3,5 m.

2.4. Karantenska soba je sestavljena iz več izoliranih prostorov s površino 12,5 - 18 m2 in je izolirana od prostorov, kjer se hranijo živali, ki so bile v karanteni in so sprejete za poskuse.

2.5. Poleg karantenskih prostorov je izolacijski prostor za bolne živali in živali s sumom na bolezen. Površine prostorov za izolacijo so podobne površinam karantenskih prostorov.

2.6. Prostori, namenjeni za zadrževanje poskusnih živali, se lahko odpirajo na en skupni hodnik ali se nahajajo med dvema hodnikoma in imajo izhode na vsakega od njih. Pri postavitvi z enim koridorjem so "umazane" in "čiste" storitve na različnih koncih hodnika.

Pri dvohodniškem sistemu se hrana in živali v karanteni dobavljajo po enem hodniku (»čisto«), pred začetkom dela z živalmi pa vstopijo zaposleni v čistih kombinezonih in nadomestni obutvi. Po drugem (»umazanem«) hodniku se odstranjuje neporabljena hrana in gnoj, odnašajo živalska trupla in zaposleni po delu z živalmi odhajajo.

Če ni mogoče izolirati "umazanih" in "čistih" tokov, je dovoljeno uporabljati isto sobo za tak ali drugačen namen, pod pogojem, da se razkuži vsakič, ko "umazan" tok prehaja skozenj.

2.7. Območje prostorov za vzdrževanje posamezne vrste poskusne živali so 12,5 - 18 m2; Površina prostorov za zadrževanje poskusnih živali, razdeljena na odseke, se določi z izračunom.

2.8. Območje sterilizacijske sobe ali škatle za delo raziskovalcev z neokuženimi živalmi se določi z izračunom na podlagi posebnosti predlaganega dela.

2.9. Območja izoliranih prostorov za delo s poskusnimi živalmi, okuženimi s povzročitelji posebej nevarnih okužb, in za delo s poskusnimi živalmi, kontaminiranimi z radioaktivnimi snovmi, ter površina operacijskih sob za vsako izolirano sobo se določijo z izračunom na podlagi pogoji tehnološke in posebne opreme, ki se uporablja za izvajanje potrebnih manipulacij.

2.10. Skupna površina prostorov, ki jih zasedajo krmna kuhinja, oddelek za dezinfekcijo in pranje ter skladišče čiste rezervne opreme, naj bi znašala približno 50% celotne površine prostorov, ki jih zasedajo živali (v velikih vivarijih ta odstotek). se lahko nekoliko zmanjša).

Krmno kuhinjo sestavljata dva sosednja prostora namenjena predelavi in ​​pripravi krme. Vsaka soba mora imeti dostop do hodnika.

Oddelek za dezinfekcijo in pranje (en ali več) je sestavljen iz dveh prostorov, ki sta povezani s prehodnim avtoklavom ali prehodno komoro za suho ogrevanje.

Zasnova oddelka za dezinfekcijo in pranje mora predvidevati drugačno zaporedje njegovega delovanja:

v prisotnosti okuženega materiala - predhodna sterilizacija opreme in posteljnine z nadaljnjim mehanskim čiščenjem slednjega v drugi sobi;

sterilizacija po mehanskem čiščenju celic in opreme, ko ni nevarnosti prisotnosti kontaminiranega materiala.

Ne glede na lokacijo vivarija (v ločeni stavbi ali v zgornjem nadstropju laboratorijske zgradbe) je treba v oddelku za dezinfekcijo in pranje zagotoviti odvod za smeti za odstranjevanje umazane smeti in mehanizirano dvigovanje materialov in opreme.

Skladišče čistega inventarja in opreme se nahaja poleg oddelka za dezinfekcijo in pranje.

2.11. Za shranjevanje posteljnine (ostružki, žagovina, šota itd.) Sta dodeljena dva prostora: ena za sterilizirano in pakirano v posodi, ki jo uporablja ta vivarij, druga za shranjevanje na novo kupljene posteljnine.

2.12. Pri načrtovanju prostorov vivarija je treba zagotoviti maksimalno izolacijo:

vse svoje prostore iz drugih oddelkov, ki so del raziskovalne ustanove;

izolacijski in karantenski prostori od ostalih prostorov vivarija;

med krmno kuhinjo, prostori za živali in oddelkom za dezinfekcijo in pranje.

2.13. V vsakem posameznem primeru se glede na uporabljeno opremo, stopnjo mehanizacije proizvodnih procesov in vrste hrane za poskusne živali določi območje, ki ga zasedajo krmna kuhinja, oddelek za dezinfekcijo in pranje ter skladišče za čisto rezervno opremo.

Dimenzije površin navedenih prostorov so navedene v projektni nalogi.

3. Veterinarske, sanitarne in tehnološke zahteve za gradbene rešitve za prostore vivarija in inženirsko opremo

Svetilke in svetilke zaprtega tipa morajo biti dostopne za mokro čiščenje.

3.5. Prostori vivarija, v katerih se hranijo laboratorijske živali, so opremljeni s prisilnim dovodnim in izpušnim prezračevalnim sistemom, ki zagotavlja stopnjo izmenjave zraka ter pogoje temperature in vlažnosti v skladu s podatki iz tabele. .

3.6. Pogoji temperature in vlažnosti v drugih prostorih vivarija morajo biti zagotovljeni v skladu s podatki iz tabele. .

SNiP 11.01-2003. Navodilo o postopku za razvoj, usklajevanje, odobritev in sestavo projektne dokumentacije za gradnjo podjetij, zgradb in objektov.

. SaNPiN 2.2.1/2.1.1.1200-03. Sanitarno zaščitna območja in sanitarna klasifikacija podjetij, struktur in drugih objektov (Nova izdaja. Odobreno z Odlokom glavnega sanitarnega zdravnika Ruske federacije št. 74 z dne 25.09.07, registrirano pri Ministrstvu za pravosodje Ruske federacije št. 10995 z dne 25.01.08).

Pitna voda. Higienske zahteve za kakovost vode centraliziranih sistemov za oskrbo s pitno vodo. Kontrola kakovosti.

RD-APK 3.10.07.02-09

MINISTRSTVO ZA KMETIJSTVO
RUSKA FEDERACIJA

Moskva 2009

Razvil: dr. kmetijski znanosti, umetnost. znanstveni sodelavci P.N. Vinogradov, dr. tehn. znanosti S.S. Ševčenko, O.L. Sedov, E.S. Garafutdinova, M.F. Malygin (NPC "Giproniselkhoz"); Dr vet. znanosti, prof. V.G. Tjurin (GNU VNIIVSGE)

PREDSTAVLJENO: SPC "Giproniselkhoz".

ODOBRENA IN ZAČELA VELJAVITI: Namestnik ministra za kmetijstvo Ruske federacije A.I. Belyaev 1. december 2009

PRVIČ RAZVIT.

Datum uvedbe: 15.12.2009

1. Splošne določbe

1.1. Te smernice veljajo za vse raziskovalne organizacije in izobraževalne ustanove ruskega kmetijsko-industrijskega kompleksa, ne glede na njihovo organizacijsko in pravno obliko, ki pri svojem delu uporabljajo laboratorijske (poskusne, poskusne) živali.

V skladu z zveznim zakonom "o tehničnih predpisih" (ki ga je sprejela Državna duma 15. decembra 2002 in odobril Svet federacije 18. decembra 2002), je pred sprejetjem ustreznih predpisov tehnični predpis na področju veterine in sanitarni ukrepi se izvajajo v skladu z zakonom Ruske federacije " O veterinarski medicini" (odobreno 14. maja 1993, št. 4979-1).

1.2. Metodološka priporočila veljajo tako za novo zasnovane prostore za zadrževanje in delo z laboratorijskimi živalmi - eksperimentalne biološke klinike, vivarije itd., Kot tudi za obstoječe in rekonstruirane.

1.3. Objekti za zadrževanje in delo z laboratorijskimi živalmi so znanstvene in pomožne enote raziskovalnih organizacij, izobraževalnih ustanov in so ustvarjeni za vzdrževanje in po potrebi vzrejo laboratorijskih živali, ki se uporabljajo pri poskusnem delu in raziskavah. Na teh objektih se lahko izvaja tudi samostojen razvoj posameznih znanstvenih vprašanj.

1.4. Standardi in zahteve za načrtovanje, gradnjo in delovanje objektov za rejo laboratorijskih živali, določeni v teh smernicah, so namenjeni zagotavljanju varnosti osebja, ki dela z živalmi, in prebivalstva kot celote pred pojavom antroposavnoz in drugih bolezni.

1.5. Razvoj, usklajevanje, odobritev in sestava projektne dokumentacije za gradnjo objektov za zadrževanje laboratorijskih živali se izvajajo v skladu z zahtevami SNiP 11.01-2003.

1.6. Objekt za zadrževanje laboratorijskih živali (v nadaljnjem besedilu: vivarij) se nahaja v ločeni stavbi (gradbeni kompleks) ali v zgornjih nadstropjih laboratorijskih zgradb veterinarskih državnih znanstvenih ustanov, pa tudi na ozemlju izobraževalnih ustanov.

1.7. Vivariji morajo biti opremljeni s pitno vodo, vključno s toplo vodo, elektriko, opremljeni s kanalizacijo (cevi s premerom najmanj 100 mm), dovodnim in izpušnim prezračevanjem, ogrevanjem, varnostnimi in požarnimi alarmi ter imeti priročne dostopne ceste.

1.8. Razdalja med ločeno stavbo vivarija in zgradbami raziskovalnih ustanov, ki vključujejo pravi vivarij, ne sme biti manjša od razdalje požarnih prelomov, ki jih določajo veljavna pravila požarne varnosti v Ruski federaciji.

1.9. Posamezne stavbe vivarija morajo biti ograjene s trdno ograjo in ločene od stanovanjskega območja s sanitarno varovalnim pasom. Območje naj bo urejeno.

Mere sanitarno zaščitnega območja so določene z zahtevami SaNPiN 2.2.1 / 2.1.1.1200-03.

1.10. Mere sanitarno zaščitnega območja za vivarije, ki se nahajajo v ločenih upravnih in industrijskih stavbah in imajo izoliran izhod, se za vsak primer posebej dogovorijo z državnimi sanitarnimi in veterinarskimi nadzornimi organi.

2. Sestava, relativni položaj in standardi površin za prostore vivarija

2.1. Vsak vivarij mora vključevati prostore, zasnovane v skladu z veljavnimi gradbenimi predpisi in predpisi v skladu z veljavnimi veterinarskimi in sanitarnimi zahtevami ter zoohigienskimi standardi, vključno z:

soba za osebje z individualnimi omaricami za delovna oblačila;

prostori za sprejem in karanteno živali, ki na novo prispejo v vivarij;

izolator;

prostori za zadrževanje poskusnih živali (ločeni za vsako vrsto) ali (v soglasju z državnimi veterinarsko-sanitarnimi nadzornimi organi) razdeljeni na oddelke po vrstah živali;

sterilizacijski prostor ali boks za raziskovalce za delo z neokuženimi živalmi, s prostorom za obdukcijo živali in hladilnikom za začasno hrambo trupel;

izolirani prostori za zadrževanje poskusnih živali, okuženih s kulturami povzročiteljev posebej nevarnih okužb ali radioaktivnih snovi (ločeno) z operacijsko sobo v vsaki izolirani sobi, ki ima hladilnik in potrebno opremo za okužbo in disekcijo živali;

krmna kuhinja za pripravo krme (mora biti opremljena s štedilnikom in hladilnikom);

dezinfekcijsko-pralni oddelek za pranje z vročo vodo, dezinfekcijo in sušenje kletk in druge opreme;

skladišče čiste (razkužene) rezervne opreme: kletke, pojilniki itd.;

sanitarni blok (tuš in WC);

prostor, opremljen s pečjo za sežiganje živalskih trupel;

splošna hladilna komora za shranjevanje živalskih trupel;

skladišče krme;

skladiščenje smeti;

v ločenem prostoru ali v samostojnem objektu - tehnična enota za klimatizacijo, prezračevanje, električne in druge posebne inštalacije.

2.2. Vsak vivarij mora imeti prostor za sprejem prihajajočih živali. V vivarijih, kjer se zadržujejo majhni glodavci, je pred sprejemnim oddelkom nameščen izoliran predprostor, v katerega vstopi in raztovori vozilo s prispelimi živalmi.

Kadar se vivarij nahaja v zgornjih nadstropjih laboratorijskih zgradb, se sprejemni oddelek in izoliran predprostor nahajata v prvem nadstropju laboratorijske zgradbe in sta z vivarijem povezana z dvigalom, ki se uporablja samo za dvigovanje laboratorijskih živali.

2.3. Sprejemna soba je prostor s površino 12,5 - 18 m2 z naravno in umetno razsvetljavo v skladu z zahtevami.

Višina vseh prostorov vivarija je 3 - 3,5 m.

2.4. Karantenska soba je sestavljena iz več izoliranih prostorov s površino 12,5 - 18 m2 in je izolirana od prostorov, kjer se hranijo živali, ki so bile v karanteni in so sprejete za poskuse.

2.5. Poleg karantenskih prostorov je izolacijski prostor za bolne živali in živali s sumom na bolezen. Površine prostorov za izolacijo so podobne površinam karantenskih prostorov.

2.6. Prostori, namenjeni za zadrževanje poskusnih živali, se lahko odpirajo na en skupni hodnik ali se nahajajo med dvema hodnikoma in imajo izhode na vsakega od njih. Pri postavitvi z enim koridorjem so "umazane" in "čiste" storitve na različnih koncih hodnika.

Pri dvohodniškem sistemu se hrana in živali v karanteni dobavljajo po enem hodniku (»čisto«), pred začetkom dela z živalmi pa vstopijo zaposleni v čistih kombinezonih in nadomestni obutvi. Po drugem (»umazanem«) hodniku se odstranjuje neporabljena hrana in gnoj, odnašajo živalska trupla in zaposleni po delu z živalmi odhajajo.

Če ni mogoče izolirati "umazanih" in "čistih" tokov, je dovoljeno uporabljati isto sobo za tak ali drugačen namen, pod pogojem, da se razkuži vsakič, ko "umazan" tok prehaja skozenj.

2.7. Površina prostorov za zadrževanje nekaterih vrst poskusnih živali je 12,5 - 18 m2; Površina prostorov za zadrževanje poskusnih živali, razdeljena na odseke, se določi z izračunom.

2.8. Območje sterilizacijske sobe ali škatle za delo raziskovalcev z neokuženimi živalmi se določi z izračunom na podlagi posebnosti predlaganega dela.

2.9. Območja izoliranih prostorov za delo s poskusnimi živalmi, okuženimi s povzročitelji posebej nevarnih okužb, in za delo s poskusnimi živalmi, kontaminiranimi z radioaktivnimi snovmi, ter površina operacijskih sob za vsako izolirano sobo se določijo z izračunom na podlagi pogoji tehnološke in posebne opreme, ki se uporablja za izvajanje potrebnih manipulacij.

2.10. Skupna površina prostorov, ki jih zasedajo krmna kuhinja, oddelek za dezinfekcijo in pranje ter skladišče čiste rezervne opreme, naj bi znašala približno 50% celotne površine prostorov, ki jih zasedajo živali (v velikih vivarijih ta odstotek). se lahko nekoliko zmanjša).

Krmno kuhinjo sestavljata dva sosednja prostora namenjena predelavi in ​​pripravi krme. Vsaka soba mora imeti dostop do hodnika.

Oddelek za dezinfekcijo in pranje (en ali več) je sestavljen iz dveh prostorov, ki sta povezani s prehodnim avtoklavom ali prehodno komoro za suho ogrevanje.

Zasnova oddelka za dezinfekcijo in pranje mora predvidevati drugačno zaporedje njegovega delovanja:

v prisotnosti okuženega materiala - predhodna sterilizacija opreme in posteljnine z nadaljnjim mehanskim čiščenjem slednjega v drugi sobi;

sterilizacija po mehanskem čiščenju celic in opreme, ko ni nevarnosti prisotnosti kontaminiranega materiala.

Ne glede na lokacijo vivarija (v ločeni stavbi ali v zgornjem nadstropju laboratorijske zgradbe) je treba v oddelku za dezinfekcijo in pranje zagotoviti odvod za smeti za odstranjevanje umazane smeti in mehanizirano dvigovanje materialov in opreme.

Skladišče čistega inventarja in opreme se nahaja poleg oddelka za dezinfekcijo in pranje.

2.11. Za shranjevanje posteljnine (ostružki, žagovina, šota itd.) Sta dodeljena dva prostora: ena za sterilizirano in pakirano v posodi, ki jo uporablja ta vivarij, druga za shranjevanje na novo kupljene posteljnine.

2.12. Pri načrtovanju prostorov vivarija je treba zagotoviti maksimalno izolacijo:

vse svoje prostore iz drugih oddelkov, ki so del raziskovalne ustanove;

izolacijski in karantenski prostori od ostalih prostorov vivarija;

med krmno kuhinjo, prostori za živali in oddelkom za dezinfekcijo in pranje.

2.13. V vsakem posameznem primeru se glede na uporabljeno opremo, stopnjo mehanizacije proizvodnih procesov in vrste hrane za poskusne živali določi območje, ki ga zasedajo krmna kuhinja, oddelek za dezinfekcijo in pranje ter skladišče za čisto rezervno opremo.

Dimenzije površin navedenih prostorov so navedene v projektni nalogi.

3. Veterinarske, sanitarne in tehnološke zahteve za gradbene rešitve za prostore vivarija in inženirsko opremo

Svetilke in svetilke zaprtega tipa morajo biti dostopne za mokro čiščenje.

3.5. Prostori vivarija, v katerih se hranijo laboratorijske živali, so opremljeni s prisilnim dovodnim in izpušnim prezračevalnim sistemom, ki zagotavlja stopnjo izmenjave zraka ter pogoje temperature in vlažnosti v skladu s podatki iz tabele. .

3.6. Pogoji temperature in vlažnosti v drugih prostorih vivarija morajo biti zagotovljeni v skladu s podatki iz tabele. .

3.7. V toplem obdobju leta je treba prostorom zagotoviti naravni dotok zunanjega zraka skozi okna, ki se odpirajo.

3.8. Prostori, navedeni v odstavku, morajo biti opremljeni s kanalizacijo in imajo oskrbo s toplo in hladno vodo.

3.9. Vivariji morajo biti opremljeni z lokalno kanalizacijo, ki vključuje vse stopnje mehanskega in biološkega čiščenja, zaradi potencialne nevarnosti recikliranih odpadkov, ki nastajajo pri obratovanju vivarija.

3.10. Kanalizacijske sisteme je treba načrtovati ločeno za industrijske, gospodinjske in meteorne odtoke.

Količina in značilnosti industrijske odpadne vode iz pranja in dezinfekcije tehnološke opreme (kletke in oprema) in ograjenih konstrukcij (tla in stene) so sprejete za tehnološki del projekta. Količino gospodinjskih odpadkov je treba upoštevati v skladu s SNiP 2.04.01-85*.

3.11. Za odvajanje in zbiranje odpadne vode po pranju in razkuževanju tehnološke opreme in tal je potrebno namestiti pladnje, pokrite z odstranljivimi perforiranimi ploščami in lestvami. Naklon pladnjev mora biti najmanj 0,02.

3.12. Pri načrtovanju lokalne kanalizacije za vivarije je treba upoštevati naslednje zahteve:

odpadno vodo iz prostorov za sežig trupel je treba sterilizirati v manjusu z živo paro pri temperaturi 120 °C 30 minut ali v parni napravi pri temperaturi 110 °C 10 minut; v primeru posebno nevarnih okužb se odpadna voda sterilizira pri 140 °C in 130 °C 20 oziroma 60 minut;

industrijske in gospodinjske odpadne vode iz pomivanja tal ter tehnološke opreme za pranje in razkuževanje je treba pred izpustom v kanalizacijo zbrati v posebnem sprejemniku in razkužiti s pripravki, ki vsebujejo klor;

nevihtni odtoki z ozemlja samostoječih vivarijev, ki so neugodni v veterinarskem in sanitarnem smislu, so predmet dezinfekcije s kemikalijami;

nastalo mehansko in biološko blato odpadne vode se sežge.

3.13. Glavni dovodni in izpušni prezračevalni kanali, cevi za napajanje, oskrbo z vodo in kanalizacijo morajo biti nameščeni v posebnih nišah hodnika in imeti prost dostop za pregled in popravilo.

3.14. Izolirani prostori za zadrževanje poskusnih živali, okuženih s kulturami povzročiteljev posebno nevarnih okužb ali radioaktivnih snovi, in izolacijski prostor so opremljeni z lokalnimi prezračevalnimi sistemi s filtri, ki zagotavljajo 100-odstotno čiščenje in dezinfekcijo izpuščenega zraka. Prezračevalni sistem mora v teh prostorih zagotavljati znižan (za 3-5 mm Hg) atmosferski zračni tlak glede na druge prostore vivarija. Zračenje v teh prostorih z odpiranjem oken je prepovedano.

4. Oprema vivarija in bivalni pogoji za živali

4.1. Miši, podgane, hrčki, morski prašički in zajci so nameščeni v kletkah, nameščenih na kovinskih policah.

4.2. Stenski ali drugače oblikovani regali morajo imeti odstranljive nosilce in premične police, ki omogočajo pretvorbo v kletke različnih dimenzij z različnimi vrstami laboratorijskih živali.

4.3. Za izračun proizvodnih površin je treba izhajati iz naslednjih standardov za namestitev živali v kletke (tabela).

Opombe

1. Za približno določitev proizvodnega območja je treba izhajati iz izračuna, da mora biti na 1 cm2 površine dna kletke 1 g teže živali.

2. Regali so postavljeni predvsem ob stenah in naj zavzemajo približno 40% proizvodne površine.

4.4. Psi so nameščeni v ločenih kabinah (boksih) strogo individualno. Dimenzije boksa morajo ustrezati dolžini in višini živali.

Dimenzije boksa za velike pse nad 22,5 kg - 1,2 × 1,8 m = 2,2 m2, srednje pse s težo 16 - 22,5 kg - 1,2 × 1,5 m = 1,8 m2, majhne 4,5 - 16 kg - 0,9 × 1,2 m = 1,1 m2. Razmak med palicami je 4,5 - 5,5 cm, premer kovinskih palic je 0,5 - 0,6 cm. Stranske stene so trdne. Na spodnjo steno (tla) so položene lesene plošče.

Hranjenje in napajanje - v boksu. Ograde za sprehajanje se uredijo individualno, do 2 m2 na žival. Čas hoje - vsaj 2-krat na dan, trajanje - najmanj 20 minut. Treba je zagotoviti ločeno zadrževanje samcev od samic, mladičev in agresivnih živali.

4.5. Na ozemlju vivarija se gradijo posebne sobe, opremljene s kabinami za pse. Ograjeni prostori (hodi) so pritrjeni na kabine. Vsak pes naj ima svojo ogrado.

Mere kabine, m: dolžina - 2; širina - 1,5; višina sprednje stene je 2,5, zadnja stena pa 1,5 - 2; višina vrat kabine - 1,7, širina - 0,7. Nad vrati kabine je nameščen zastekljen okvir. Na dnu vrat, nameščenih v zadnji steni kabine, ki je sprednja stena ograde, je narejena luknja v ohišje dimenzij 40x50 cm, ki je prevlečeno z gosto tkanino za zimsko zaščito pred mrazom.

Mere ohišja, m: dolžina - 3, širina - 2, višina - 2,2. V njegovi čelni steni so izdelana vrata dimenzij 1,8 x 0,7 m.

4.6. Mačke so nameščene v ograjenih prostorih po pet glav, kjer so na voljo dovolj velike police (ležišča) za namestitev vseh živali. Površina ograde za eno mačko je 0,5 m2. Pred vhodom v ogrado je nameščen mrežast predprostor.

4.7. V primeru namestitve domačih živali in perutnine v vivarije za znanstvene namene so prostori zanje zgrajeni v skladu z veljavnimi standardi tehnološke zasnove v skladu z zoohigienskimi standardi, določenimi v teh standardih.

5. Sprejem živali v vivarij

5.1. Vivarij se polni z živalmi in pticami iz specializiranih drevesnic, ki niso okužene z nalezljivimi boleznimi.

Nakup živali in ptic od drugih organizacij in posameznikov je dovoljen, če jih ni mogoče kupiti v drevesnicah in je ob vsakem nakupu na voljo veterinarsko spričevalo, ki potrjuje dobrobit organizacije (kmetije, posameznika) za kužne bolezni.

5.2. Živali sprejemamo v vivarij z veterinarskim spričevalom ali spremnimi dokumenti iz drevesnice.

5.3. Živali, prejete iz vrtca, so nameščene v izoliranih oddelkih za obdobje treh dni, da se prilagodijo novim razmeram. Nadaljnja obdobja izolacije ali karantene za te živali se določijo glede na pogoje zadrževanja živali, naravo prihajajočih poskusov, razdaljo, pogoje prevoza itd.

5.4. Za živali, ki niso prejete iz drevesnic, se določijo naslednja obdobja karantene:

za miši in podgane - 14 dni, morske prašičke in zajce - 21, pse in mačke - 30, za druge živali in ptice - 21 dni.

V nekaterih primerih, ko se v poskusih uporabljajo breje samice, novorojenčki in mlade živali, pa tudi v kratkotrajnih poskusih, se lahko trajanje karantene skrajša, če so te živali nameščene v izoliranih prostorih in so ustrezno nadzorovane.

5.5. V času karantene so živali podvržene dnevnemu kliničnemu opazovanju: termometriji in beleženju splošnega stanja živali v posebnem dnevniku.

5.6. V karantenskih in poskusnih oddelkih so živali nameščene v čistih, predhodno razkuženih (avtoklaviranih) kletkah.

5.7. Za živali, ki se nahajajo v karantenski stavbi, skrbi osebje, dodeljeno tem prostorom.

5.8. Prepovedano je prenašati hrano, oblačila in opremo iz karantenskih prostorov v druge prostore in oddelke za poskusne živali.

5.9. V času karantene se kletke občasno menjajo. Po koncu karantene se izpraznjene celice in oprema prenesejo v oddelek za dezinfekcijo in pranje.

Čiščenje in pranje kletk in druge opreme iz karantenskih oddelkov se lahko izvaja v splošnem oddelku za dezinfekcijo in pranje vivarija le po predhodni dezinfekciji. Odpadke je treba tudi razkužiti oziroma sežgati. Metode dezinfekcije, dezinsekcije in način avtoklaviranja se določijo v vsakem posameznem primeru, odvisno od posebnosti ustanove.

5.10. V obdobju prilagoditve ali karantene se živali, pri katerih obstaja sum na kužne bolezni, opravijo bakteriološki pregled. Če je kužna bolezen potrjena, se miši, podgane, hrčki, morski prašički in kunci celotne prispele serije uničijo, za pse, mačke in druge živali pa se karantena podaljša glede na ugotovljeno bolezen.

5.11. Karantenski prostori se temeljito razkužijo po vsaki seriji živali, preneseni v poskus, in po vsakem primeru odkritja nalezljivih bolezni.

5.12. V primeru pojava množičnih bolezni pri živalih, opazovanih v karanteni, ali če se med poskusi odkrijejo posamezni primeri nalezljivih bolezni, ki so posebej nevarne za laboratorijske živali in ljudi, se v vivariju izvajajo potrebni nizi preventivnih ukrepov. V tem primeru se testiranje na živalih začasno ustavi.

5.13. Po poteku karantene se živali prenesejo v poskusne oddelke.

6. Obratovalni čas in osnovna pravila za rejo živali

6.1. V vsakem posameznem prostoru je priporočljivo imeti samo eno vrsto živali. Če je v skladu s pogoji poskusa potrebno hraniti laboratorijske živali različnih vrst skupaj v enem delu, jih je treba postaviti na različne stojala.

6.2. Vsaka kletka (boks, ograda ipd.) mora imeti etiketo s podatki o živali in trajanju poskusa.

6.3. Laboratorijske živali in ptice se gojijo v kletkah s trdnim dnom na steljki ali v kletkah z mrežastim dnom – podom. Kot posteljnina se uporabljajo žagovina, oblanci ali posteljna šota. Stelja je predhodno avtoklavirana ali shranjena v sušilniku na suho (150 - 180 °C 15 - 20 minut). Debelina sloja stelje v kletki je 5 - 10 mm. Pri zadrževanju živali v kletkah z mrežastim dnom se stelja nasuje v pladenj (pekač), ki se nahaja pod mrežastim dnom.

6.4. Vsa dela pri negi in vzdrževanju laboratorijskih živali se izvajajo v skladu z dnevnim redom in delovnimi predpisi, ki jih potrdi vodja ustanove. Dnevna rutina predvideva čas za sanacijo prostorov in opreme, razdeljevanje krme ter izvajanje poskusnega dela in manipulacij.

6.5. Krmljenje laboratorijskih živali se izvaja v skladu z obstoječimi standardi.

6.6. Krma in polizdelki so shranjeni v prostoru, posebej določenem za ta namen. Krma se razdeljuje v skladu z ustaljenim postopkom.

V krmni kuhinji vivarija je dovoljeno skladiščenje krme za največ dva do tri dni. Pri hranjenju živali z granulirano krmo in če so v kletkah napajalni bunkerji, je dovoljen predhodni prevzem krme iz skladišča za sedem do deset dni.

6.7. Za shranjevanje zalog krme so v krmni kuhinji in v shrambi vivarija opremljene posebne skrinje (kovinske ali obložene s kositrom). Hitro pokvarljiva živila hranimo v hladilniku. Dostavo krme iz skladišča izvaja posebej določeno osebje (delavci, ki niso neposredno vključeni v oskrbo živali).

6.8. Razdeljevanje krme med prostori oddelkov izvajajo delavci ali kuhinjsko osebje, posebej dodeljeno za te namene, v razkuženih posodah, dodeljenih vsakemu oddelku. Odpis krme se izvaja po ustaljenem postopku glede na dejansko razpoložljivost živali za vsak dan.

6.9. Osebju, ki skrbi za laboratorijske živali, in nepooblaščenim osebam je prepovedan vstop v krmno kuhinjo.

6.10. Laboratorijske živali se oskrbujejo s pitno vodo, kakovost vode mora ustrezati SanPiN 2.1.4.1074-01.

6.11. Kaljenje zrnja v zeleno maso za krmljenje laboratorijskih živali se izvaja v posebej za to določenih prostorih. Živalim je dovoljeno krmiti koreninsko maso rastlin, če v njej ni plesni.

6.12. Razdeljevanje krme in napajanje živali je treba izvajati šele po čiščenju prostorov, čiščenju ali menjavi kletk in odstranitvi umazane opreme, palet s steljo in drugih materialov, ki jih je treba razkužiti ali odstraniti iz oddelkov.

6.13. Kletke in prostori se čistijo z opremo, ki je strogo dodeljena vsaki sobi.

6.14. Pri občasni menjavi kletk se živali 1-2 krat na teden presadijo v predhodno razkužene kletke s pripravljeno steljo, krmilniki in pivci. Umazane kletke skupaj s steljo, krmilniki in pivci se prenesejo v oddelek za dezinfekcijo in pranje za nadaljnjo obdelavo.

6.15. Celice se dnevno čistijo. V tem primeru se onesnažena stelja in drugi odpadki iz kletk zbirajo v posebnih kovinskih rezervoarjih s pokrovom. Rezervoarji se tesno zaprejo in prenesejo v oddelek za dezinfekcijo in pranje.

6.16. Pri uporabi kletk z mrežastim dnom in pladnji, izoliranimi od kletk, se slednje občasno (vsaj enkrat na teden) zamenjajo z novimi. Umazane palete s steljo se prenesejo v oddelek za dezinfekcijo in pranje v nadaljnjo obdelavo.

6.17. Kadar en delavec oskrbuje več vrst laboratorijskih živali, se najprej obdelajo kletke z morskimi prašički, nato kletke z mišmi, podganami in zajci ter nazadnje prostori, kjer so psi in mačke.

6.18. Neposredno v oddelkih je prepovedano pranje in razkuževanje kletk, krmilnikov in posod za pitje.

6.19. Pred koncem delovnega dne v oddelkih se tla mokro očistijo z 1% raztopino kloramina ali drugega razkužila. Vsaj enkrat mesečno se izvaja sanitarni dan, med katerim se očistijo vsi prostori. Postopek izvajanja sanitarnega dne določi vodja vivarija.

6.20. Dezinfekcijo, čiščenje in pranje kletk, krmilnikov, posod za pitje in druge opreme izvajajo delavci, ki so posebej dodeljeni oddelku za dezinfekcijo in pranje. Za spremljanje učinkovitosti čiščenja in razkuževanja opreme je odgovoren veterinar vivarija.

6.21. Pogoje za zbiranje, skladiščenje, odstranitev (ali odstranjevanje) odpadkov (stelja, gnoj, ostanki krme itd.) Je treba določiti v vsakem posameznem primeru v dogovoru z lokalnimi oblastmi in institucijami Rospotrebnadzor. Pri delu z okuženim materialom je potrebno odpadke nevtralizirati z avtoklaviranjem ali obdelavo z razkužilnimi raztopinami.

6.22. V oddelkih s poskusnimi živalmi je treba stalno spremljati pogoje temperature in vlažnosti. Za nadzor kakovosti zračnega okolja v prostorih, kjer se gojijo živali, je priporočljivo občasno (2-3 krat na mesec) določiti koncentracijo škodljivih plinov (dioksida in amoniaka).

6.23. Prenos živali za poskuse se izvaja po enkratnih zahtevah v skladu z letno vlogo iz laboratorijev, ki jih odobri vodja ustanove. Delo z živalmi je dovoljeno samo v urah, določenih v dnevnem režimu vivarija.

6.24. Če v oddelkih najdemo bolne živali, jih z vednostjo izvajalca poskusov uničimo ali premestimo v izolacijo. Vprašanje nadaljnje uporabe bolnih živali se reši v največ dveh dneh.

6.25. Pred obdukcijo se živalska trupla hranijo v posebnem hladilniku največ en dan, nato pa jih je treba odstraniti. Skladiščenje živalskih trupel v kletkah in na tleh v poskusnih prostorih je strogo prepovedano.

6.26. Patoanatomsko obdukcijo živali opravi izvajalec poskusa. V primeru pogina živali, ne glede na poskus, je pri obdukciji prisoten veterinar vivarija.

6.27. Vsak primer pogina ali prisilnega zakola živali je treba zabeležiti v posebni dnevnik.

6.28. Nepooblaščenim osebam je prepovedan obisk vivarija brez posebnega dovoljenja. Delavci zavoda, ki opravljajo delo v vivariju, so dolžni:

upoštevati ustaljena pravila dnevne rutine in delovnega časa vivarija;

izvajati sistematično opazovanje vaših poskusnih živali;

voditi primarno dokumentacijo, pravočasno izpolniti nalepke na kletkah s poskusnimi živalmi;

obiščite samo tiste prostore vivarija, v katerih so živali, dodeljene temu zaposlenemu;

po končanih poskusih ali drugih tekočih delih s poskusnimi živalmi zapustiti delovno mesto v pravilnem redu;

spremljati pravočasen odpis poskusnih živali, ki so zapustile poskus, poginile ali bile prisilno usmrčene;

obveščati strokovnjake vivarijev o vseh opaženih primerih bolezni pri poskusnih živalih, kakor tudi nemudoma obveščati strokovnjake vivarijev o domnevnih patoloških stanjih živali v skladu s pogoji poskusov.

6.29. Zaposlenim v ustanovi, ki opravlja delo v vivariju s poskusnimi živalmi, je prepovedano dajati kakršna koli navodila delavcem za spremembo režima zadrževanja in hranjenja živali brez soglasja strokovnjakov vivarija.

6.30. Kadar delavci te ustanove izvajajo skupne raziskave na živalih v drugih ustanovah, je delo teh delavcev v vivariju (kliniki) njihovega inštituta (ustanove) za ta čas prepovedano.

6.31. Vsa dejanja, ki lahko povzročijo bolečino laboratorijskim živalim (operacije, popolna izkrvavitev, implantacija senzorjev itd., pa tudi prisilni zakol živali), morajo biti izvedena z uporabo anestezije. Če je v skladu s pogoji poskusa uporaba anestezije kontraindicirana, je treba vse zgornje ukrepe izvesti čim prej.

6.32. Med poskusom mora delavec, ki izvaja ta poskus, upoštevati naslednja pravila humanega ravnanja z laboratorijskimi (poskusnimi) živalmi.

V primerih, ko je predviden kirurški poseg ali poskus z bolečo stimulacijo, je treba anestezijo izvesti, preden žival privežemo na stroj.

Izračun količine anestetične snovi je treba opraviti na 1 kg ali 1 g teže živali. Ime snovi in ​​njeno količino je treba zabeležiti ne samo v poročilu o poskusu, temveč tudi na posebni kartici.

Med poskusom, ko se izkaže, da je daljši od prvotno pričakovanega, je potrebno dodatno dajanje anestetikov.

Če se akutni poskus konča s poginom živali, je izvajalec poskusa dolžan žival usmrtiti, preden anestetična snov preneha delovati.

Po koncu kirurškega posega je treba žival prenesti v pooperativno sobo na posebnih nosilih, pri čemer se izključi možnost premika tkiva, razhajanja šivov itd.

Izvajalec poskusa mora predvideti možnost bolečin pri živali v pooperativnem obdobju in predpisati protibolečinska zdravila.

7. Število zaposlenih v vivariju

7.1. Število zaposlenih v vivariju se določi glede na obseg in naravo eksperimentalnih raziskav ter število laboratorijskih živali. V tem primeru je treba izhajati iz naslednjih standardov za obremenitev živali ene vrste na skrbnika (ob upoštevanju standardov za namestitev živali v kletke).

Pri servisiranju več vrst živali s strani ene osebe se izračun izvede na podlagi zgornjih standardov. V vsakem konkretnem primeru je treba pri določanju standardov obremenitve oskrbe živali na delavca upoštevati vrsto kletk, stopnjo mehanizacije proizvodnih procesov, vrsto krmljenja (naravna krma ali peletirana), pogostost, narava in značilnosti opravljene raziskave itd.

7.2. Pri delu z radioaktivnimi snovmi ali posebej nevarnimi okužbami, pa tudi pri zadrževanju živalskih vrst, ki niso navedene v tabeli. , standarde storitev določi predstojnik znanstvene ustanove na podlagi časovnega razporeda posameznih operacij in ob upoštevanju veljavnih standardov za storitve domačih živali.

8. Pravila osebne higiene za zaposlene v vivariju

8.1. Osebje Vivarija mora biti opremljeno s posebnimi oblačili, zaščitnimi čevlji, milom in brisačami v skladu z veljavnimi predpisi.

8.2. V prostorih z živalmi, krmni kuhinji in oddelku za dezinfekcijo in pranje je potrebno imeti razkužila za razkuževanje rok.

8.3. Osebje Vivarija mora:

pred začetkom dela odstranite vrhnja oblačila, čevlje, oblecite kombinezone, zaščitne čevlje;

po končanem delu (po možnosti pred začetkom dela) opravite zdravljenje v sanitarnem bloku (stuširajte se ali kopajte);

domača oblačila in delovna oblačila obesite le v različne predelke posamezne omare;

občasno (vendar vsaj enkrat na mesec) razkužite svoje posamezne omare;

Ob koncu vsake posamezne faze dela v skladu z dnevno rutino ter pred jedjo si obvezno umijte in razkužite roke.

8.4. V proizvodnih prostorih vivarija je strogo prepovedano jesti in kaditi.

8.5. Osebe, ki se na novo zaposlijo za delo z laboratorijskimi živalmi, morajo opraviti zdravniški pregled, vključno s testiranjem na prisotnost povzročiteljev tuberkuloze in celotne skupine črevesnih okužb. Naknadni pregledi se izvajajo najmanj enkrat letno. V vivariju ni dovoljeno delati bolnikom s tuberkulozo, spolno prenosljivimi, kožnimi in drugimi nalezljivimi boleznimi.

8.6. Pri izvajanju poskusov na živalih z nalezljivimi patogeni, ki so nevarni za ljudi, je osebje vivarija podvrženo preventivni imunizaciji.

Govedo

Žival krotimo s stiskanjem nosnega pretina s prsti, Garmsovimi, Nikolajevimi kleščami, nosnimi obroči ali pa gibanje omejimo tako, da jo z vrvjo držimo za rogove, za vrat, glavo in drugo zanko okoli nosu. Zadnje okončine so pritrjene z vrvno zanko, ki je nameščena na obeh okončinah nekoliko nad skočnimi sklepi. Pri obrezovanju in obrezovanju kopit na medeničnih okončinah živali se lahko uporabi zasuk golenice.

Biki so zavarovani z nosnimi obroči in močnim trakom za ovratnico z verigo.

Plemenjaki se ne glede na temperament pripeljejo na pregled samo na povodcu in morajo uporabljati nosilno palico (karabin) dolžine približno 2 m, ki jo pritrdijo na nosni obroč, kar prepreči nenaden napad živali na človeka.

Teleta držimo z rokami za vrat, ušesa ali s slepo ovratno zanko s posebnim vozlom in jih z vrvjo privežemo na stojalo.

Živali fiksiramo v stoječem položaju tako, da zgrabimo zgornjo čeljust s kovinsko vrvico in držalom ročaja ali v stroju preproste konstrukcije.

Mlade živali in mladice za pitanje je priročno držati s kleščami, ki jih predlaga K.P. Solovjev. Pri delu z merjasci, starejšimi prašiči in svinjami v laktaciji, zlasti tistimi, ki so zaprte v boksih, je potrebna previdnost.

Koze in ovce

Živali držijo za rogove ali vrat. Po potrebi ga pritrdite v ležečem položaju na mizi.

Konje privežemo tako, da ne morejo udarjati s sprednjimi in zadnjimi okončinami ali ugrizniti. Konjem se je treba približati nekoliko s strani, v smeri plečeta in lopatice, najbolje z leve strani, saj se konj med uporabo tega navadi. Približajo se glavi, z levo roko primejo povodec, uzdo ali grivo, z desno roko pa božajo in trepljajo vrat, viher, nato lopatico in pleče. Če je žival v hlevu brez povodca, jo je treba poklicati, da bi pritegnila pozornost nase, povabila, izgovarjala prijazne besede. Konj mora stati z glavo proti osebi.

Živali v boksu ali na pristanišču se je treba približati ne od zadaj, ampak nekoliko s strani na strani, kamor gleda.

Pri termometriji, rektalnem pregledu ali izvajanju različnih medicinskih manipulacij je zaradi zagotavljanja varnosti dela veterinarja potrebno dvigniti torakalno okončino na strani, s katere specialist izvaja manipulacijo, ali postaviti zapore na eno oz. obe zadnji okončini.

Torakalno okončino fiksiramo tako, da jo dvignemo za krtačo ali nožico in upognemo v zapestnem sklepu. Hkrati stojijo ob strani živali s hrbtom obrnjeni po glavi. Dvignjeno okončino držimo z obema rokama, med dolgotrajnimi manipulacijami pa s pomočjo pasu ali vrvi, vržene čez hrbet. Dvignjenega uda živali ne morete položiti na koleno, saj bo žival imela četrto oporno točko, kar ni varno za ljudi. Vrvi ne smete privezati na noben predmet ali oviti okoli telesa živali, saj če nepričakovano pade, konj ne bo mogel hitro osvoboditi uda. Pri pregledu zadnjih delov telesa je medenični ud fiksiran. Stoje ob konjevem križu, obrnjeni proti repu, se z eno roko naslonijo na kljuko, z drugo pa narahlo potrepljajo nogo od zgoraj navzdol, jo dvignejo, zapnejo trak za nogo ali nataknejo vrvno zanko, ki jo nato prepeljan med prednjimi okončinami, ovit okoli vratu in zavezan z nesnemljivo zanko. Pri proučevanju trdovratnih živali in za ukrotitev nemirnih konj se uporabljajo twisterji in klešče za ustnice. Če želite uporabiti zasuk, morate roko vstaviti v zanko zasuka. Primite zgornjo ustnico, jo potegnite naprej, z levo roko premaknite zasučno zanko na ustnico in jo močno zasukajte. Živali je mogoče varno omejiti v posebnih napravah. V obori je priporočljivo, da konja privežete na nosila, in da preprečite, da bi trmasta žival padla, pod trebuh namestite jermene.

Kamele

Kamele so v raziskavo dostavljene na povodcu. Kamelam se morate približati previdno, po možnosti s strani (s strani prsnih okončin). Metode krotenja teh živali so enake kot pri govedu in konjih. Upoštevati je treba specifično vedenje teh živali. Priporočljivo je, da kamele zavaruje osebje, ki nenehno skrbi zanje.

Ptico fiksiramo tako, da jo držimo v naravnem položaju za okončine in krila, brez stiskanja prsi, da se prepreči zadušitev. Pri delu z vodnimi pticami (gosmi, racami) morate držati glavo, da ne dobite udarca v oko, in izvajati manipulacije na razdalji roke.

Krznene živali

Živali držijo s posebnimi kleščami ali rokami v platnenih (z bombažno podlogo) palčnikih. Postavite na mizo in z eno roko primite za vrat, z drugo za trup. Ustno votlino je mogoče odpreti z zehalkami, ki jih je oblikoval V.L. Berestov, je priporočljivo uporabljati posebne nagobčnike. Živali lahko zavarujete v mrežaste pasti, uporabite analgetike ali pomirjevala z lokalnimi anestetiki, pa tudi anestetik.

Živalim s pomočjo lastnika nataknemo nagobčnik ali pa jim usta zavežemo z močno pletenico. V ta namen se na vrh čeljusti namesti pletenica, ki se pod spodnjo čeljustjo zaveže z enostavnim vozlom in nato na zadnji strani glave pritrdi z morskim vozlom. Če obstaja sum na steklino, pa tudi na jezne in nemirne pse, jih je bolje namestiti v posebno kovinsko kletko, katere ena stran se premika in jo stisne. Za pritrditev psov v ležečem položaju se uporablja operacijska miza za male živali, ki jim omogoča, da imajo kateri koli položaj, primeren za delo.

Med bolečimi manipulacijami so živali pritrjene v posebnem tkaninskem rokavu ali zavite v brisačo, tako da je del telesa, ki ga je treba pregledati, prost. Gobec lahko privežemo kot psu, noge pa pritrdimo z rokami, nadenemo si usnjene ali gumijaste rokavice.

. OSN-APK 2.10.24.001-04. Industrijski standardi za razsvetljavo kmetijskih podjetij, zgradb in objektov.

. SNiP 2.04.01-85*. Notranji vodovod in kanalizacija stavb.

. SaNPiN 2.1.4.1074-01. Pitna voda. Higienske zahteve za kakovost vode centraliziranih sistemov za oskrbo s pitno vodo. Kontrola kakovosti.

Poglavje 13. PRAVILA ZA ZBIRANJE PATOLOŠKEGA MATERIALA IN GA POŠILJANJE ZA LABORATORIJSKE RAZISKAVE

(Izvleček iz pravil glavnega direktorata za veterinarstvo Ministrstva za kmetijstvo ZSSR, odobren 24. junija 1971)

Če je treba ugotoviti ali potrditi vzrok bolezni ali pogina živali (vključno s pticami, živalmi, čebelami, ribami), če obstaja sum na kužno ali invazivno bolezen ali zastrupitev, je veterinar (bolničar) dolžan opraviti ustrezno patološko materiala in ga pošljite v veterinarski laboratorij na pregled.

V vseh primerih odvzema in pošiljanja materiala mora strokovnjak upoštevati spodaj navedena pravila in ustrezna navodila za boj proti boleznim živali.

Prevzem in posredovanje patološki material za bakteriološke in virološke raziskave. Patološki material se odvzame s sterilnimi instrumenti v sterilnih posodah. Površino organa (tkiva), iz katerega bomo vzeli patološki material, na mestu reza zažgemo nad plamenom ali zažgemo z razgreto kovinsko ploščo.

Patološki material se vzame čim prej po smrti živali, zlasti v topli sezoni. Ko se razgradnja začne, je material neprimeren za raziskave.

Material se pošlje v laboratorij v nekonzervirani obliki. Če materiala ni mogoče dostaviti v laboratorij v naslednjih 24-30 urah, se ohrani.

Za bakteriološke raziskave patološki material (organe ali njihove dele) konzerviramo v 30% vodni raztopini kemično čistega glicerola. Voda je predhodno sterilizirana z vrenjem ali avtoklaviranjem 30 minut. Sterilni vazelin lahko uporabite tudi kot konzervans. Material je napolnjen s tekočino za konzerviranje v količini 4-5 krat večji od njegove prostornine.

Material, namenjen virološkim raziskavam, se shrani v 30-50% raztopini kemično čistega glicerina v fiziološki raztopini natrijevega klorida. Fiziološka raztopina predhodno sterilizirajte v avtoklavu pri 120 °C 30 minut.

Trupe malih živali (pujski, jagnjeta, telički) in tudi trupe malih živali pošiljamo cele v nepredušni embalaži.

Cevaste kosti so poslane nedotaknjene z nedotaknjenimi konci. Pred tem jih temeljito očistimo mišic in kit ter jih zavijemo v gazo ali platno, navlaženo z razkužilom (5% raztopina karbolne kisline). Kosti lahko potresemo tudi z natrijevim kloridom (kuhinjsko soljo) in zavijemo v platno ali gazo.

Črevesje pred odpremo za bakteriološko in virološke raziskave brez vsebine, konci pa so zavezani. Na pregled se pošljejo deli črevesja z najbolj značilnimi patološkimi spremembami. Nalijte v kozarce s 30-40% vodno raztopino glicerina ali nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida. Volumen tekočine za konzerviranje mora povečati volumen odvzetega materiala za 5-7 krat.

Iztrebki za raziskave se pošljejo v sterilnih kozarcih, epruvetah ali kozarcih, ki so prekriti s pergamentnim papirjem. Iz živalskih trupel lahko iztrebke pošljemo v kos neodprtega črevesja, zavezanega na obeh koncih. Blato je treba dostaviti v laboratorij najkasneje 24 ur po odvzemu.

Pri pošiljanju kožnih predelov na pregled odvzamemo najbolj prizadete dele le-te v velikosti 10 x 10 cm in jih položimo v sterilno, hermetično zaprto posodo.

Kri, gnoj, sluz, urin, žolč in drugi tekoči patološki materiali za bakteriološke in virološke študije se pošljejo v zaprtih Pasteurjevih pipetah, sterilnih epruvetah ali v steklenicah, tesno zaprtih s sterilnimi gumijastimi zamaški.

Stekelca kuhamo 10-15 minut v 1-2% vodni raztopini sode, nato temeljito speremo s čisto vodo, obrišemo do suhega in damo v raztopino alkohola in etra, vzetih v enakih delih, kjer jih hranimo do uporabe. .

Kri se vzame iz vene ušesna školjka ali robovi konice ušesa, pri pticah - s površine grebena ali iz aksilarne vene. Kožo na mestu odvzema krvi odrežemo, kožo obrišemo z vatirano palčko, najprej navlaženo z alkoholom in nato z etrom. Instrumenti (igle, skalpel) morajo biti sterilni.

Prvo kapljico krvi odstranimo s sterilno vato (izjema je pri testiranju krvi na piroplazmozo, ko prvo kapljico krvi odvzamemo za bris), naslednjo prosto štrlečo kapljico pa odvzamemo na predhodno pripravljeno stekelce z hitro in rahlo dotikanje kapljice s površino kozarca. Nato kozarec s kapljico hitro obrnemo navzgor in držimo med prsti leve roke v vodoravnem položaju. Levega roba kapljice se pod kotom 45° dotakne brušenega roba drugega stekelca (ali pokrovnega stekla). Takoj, ko je kapljica enakomerno porazdeljena vzdolž roba tega kozarca, jo hitro potegnemo po površini stekelca od leve proti desni, pri čemer ne dosežemo roba za 0,5-1 cm. Širina potez mora biti ožja od stekelca. Za vsak nov bris se vzame sveža kapljica krvi.

Pripravljene krvne razmaze sušimo samo na zraku. V hladni sezoni se brisi naredijo v topli sobi ali na steklu, segretem na pokrovu toplega sterilizatorja.

Metoda fiksiranja brisov je odvisna od namena študije.

Pravilno pripravljeni razmazi krvi morajo biti tanki, enotni in dovolj dolgi. Na posušene brise in odtise z ostrim predmetom naredimo napis s številko ali imenom živali in datumom priprave brisa.

Brise iz tkiv, gnoja, organov in raznih izločkov pripravimo tako, da material s sterilno palčko ali robom drugega stekelca tanko nanesemo na predmetno stekelce. Organske delce goste konsistence, trde nodule in viskozen material damo med dve stekleni stekelci in zmeljemo. Nato očala ločimo tako, da jih potegnemo v nasprotnih smereh v vodoravni smeri. Rezultat sta dve precej tanki potezi. Včasih naredijo pripravke za prstne odtise. Da bi to naredili, kos organa, izrezan z ostrim skalpelom, zgrabimo s pinceto in na steklu naredimo več tankih odtisov s prosto površino kosa.

Odvzem materiala za patološki pregled. Material se vzame iz svežih trupel ali ubitih živali najkasneje 12, poleti pa 2-3 ure po smrti iz tistih organov ali tkiv, kjer so bili najdeni. patološke spremembe, pa tudi od najpomembnejših parenhimskih organov. Majhne tanke (ne več kot 1-2 cm debele) koščke izrežemo iz različnih območij patološko spremenjenih organov (tkiv). Skupaj s prizadetimi območji tkiva je zajeto tudi normalno tkivo, ki meji nanj. Pri izrezu koščka se upošteva mikroskopska zgradba (struktura) posameznega organa (tkiva). Torej, koščki iz ledvic, nadledvične žleze, bezgavka vzeto tako, da sta vključeni obe plasti - kortikalna in medula; iz možganov - siva in belo snov; iz vranice - bela in rdeča kaša; iz pljuč - deli organa z bronhiji in poprsnico. Iz srca se vzame več kosov: iz mišic desnega in levega prekata, desnega in levega atrija, papilarnih mišic in območja zaklopk. Od vseh organov se med ekscizijo vzame tudi njihova kapsula. Od različne oddelke prebavila izrežemo koščke velikosti 2 x 3 cm in jih, preden jih potopimo v fiksirno tekočino, napnemo na karton in prešijemo z belimi nitmi.

Odvzeti material damo v fiksirno tekočino (10% vodna raztopina nevtralnega formaldehida), katere prostornina je 4-5 krat večja od prostornine odvzetega materiala. V hladni sezoni se material, profiliran v formalinu, prenese v 30-50% raztopino glicerina (pripravljeno z 10% raztopino formaldehida), 70% alkohol ali nasičeno raztopino natrijevega klorida.

Če formaldehida ni, se kot fiksirna tekočina uporabi 96-odstotna moč. etanol ali aceton. Pri uporabi alkohola debelina kosov ne sme presegati 0,5 cm. Za histokemijske študije lahko patološki material fiksiramo tudi v Carnoyevi tekočini (absolutni alkohol - 60 ml, kloroform - 30 ml in ledocetna kislina - 10 ml) ali v Bouinovi raztopini. tekočina (koncentrirana pikrinska kislina - 15 ml, formalin - 5 ml, ledocetna kislina - 1 ml). Fiksirno tekočino menjamo vsak dan, dokler ne postane bistra. Optimalna temperatura fiksacija 37 °C.

Patološki material je fiksiran v steklu ali v skrajnem primeru v lončeni posodi.

Na kozarec z delci organov in tkiv se nalepi etiketa, na kateri je navedena številka ali ime živali in komu pripada, ter kos debelega papirja ali kartona, na katerem je na preprost (ne kemični) napisana številka živali. v njej je nameščen svinčnik.

Dajanje več raziskovalnih predmetov različnih živali v posode je možno le, če je vsak od njih vezan v gazo skupaj z ločeno etiketo.

Pakiranje in pošiljanje patološkega materiala. Trupla majhnih živali, deli trupel velikih živali in posamezni organi v sveži (nefiksirani) obliki se pošljejo v raziskavo v laboratorij samo s posebnim naročilom. Poslan material, zlasti od živali, za katere se sumi, da imajo bolezen nalezljiva bolezen, skrbno zapakirano v tesno leseno ali kovinsko škatlo, da preprečimo možnost raznašanja povzročitelja na poti. Pred pakiranjem se material zavije v platno ali vrečo, namočeno v raztopini za razkuževanje (fenolni kreolin, lizol, apneno mleko), zavije v celofan ali plastično folijo in položi v škatlo z oblanci, plevami ali žagovino.

Deli organov in tekočine, poslani v laboratorij po pošti v fiksni ali konzervirani obliki, se dajo v hermetično zaprto stekleno posodo z brušenim, plastičnim, gumijastim ali plutastim zamaškom. Zamašek pritrdimo z žico ali vrvico in napolnimo z Mendelejevim kitom (pečatni vosek, katran, parafin ali vosek), tako da je zamašek neprepusten za tekočino. Zaprte posode damo v trdno pleteno škatlo, tesno prekrito z vato, predivo, ostružki, žagovino ali drugim embalažnim materialom.

Pri pošiljanju po pošti ali kurirju patološkega materiala živali, pri katerih obstaja sum na nalezljivo bolezen, ali očitno okuženega materiala mora embalaža zagotavljati dostavo nedotaknjenega materiala in izključevati možnost širjenja povzročiteljev okužb. Vklopljeno prednja stran Paketi morajo imeti na vrhu napise: "Pozor - steklo" in "Zgoraj".

Steklenina, ki vsebuje poslane materiale, za katere se sumi, da imajo posebno nevarne bolezni (skakavost, antraks, emfizematozni karbunkul, bruceloza, tularemija, goveja peripnevmonija, goveja kuga, prašičja kuga, navidezna kokošja kuga, slinavka in parkljevka, steklina), je zahtevana pakirana v kovinski škatli. škatlo, ki jo spajkamo, zapečatimo ali zaplombiramo, nato pa ponovno zapakiramo v leseno škatlo.

Če se takšno gradivo pošilja ekspresno, ga damo v stekleno posodo, hermetično zapremo in postavimo v leseno škatlo.

Odvzem in pošiljanje patološkega materiala v primeru suma zastrupitve. Naslednji znaki lahko povzročijo sum na zastrupitev:

a) značilen vonj želodčne vsebine (grenki mandlji, česen-kloroform itd., Razen vonja uporabljenih zdravil);

b) barva želodčne vsebine: rumena (iz dušikove in pikrinske kisline, kromovih soli), zelena, modra (iz bakrovih soli) ali druge barve;

c) krvava želodčna vsebina;

d) sumljivi vključki v želodčni vsebini - beli kristali sublimata in strihnina, neraztopljeni beli kristali arzena;

e) otekla, povečana, ohlapna, lahko raztrgana sivo-rumene barve itd. sluznica želodca, ledvic, srca;

f) poškodbe začetnih delov prebavnega trakta ( ustne votline, požiralnik, želodec);

g) spremembe barve in konsistence krvi.

Ob sumu na zastrupitev se material iz trupel poginulih živali pošlje v laboratorij za kemično in histološke študije. Hkrati se za določitev vira zastrupitve pošlje vsa krma (1 kg vsake vrste krme), s katero so bile krmljene živali. Ne pozabite poslati ostankov hrane iz podajalnika.

Za kemijske raziskave se v laboratorij v ločenih kozarcih pošlje naslednji material:

a) del požiralnika in prizadeti del želodca z vsebino (v količini 0,5 kg), pri velikem in majhnem govedu ter kamelah - del požiralnika, sirišča in majhna količina vsebine iz različnih mest črevesa. abomasum, vamp.

Želodec in njegova vsebina se vzameta v naslednjem vrstnem redu.

Med obdukcijo po pregledu notranji organi Požiralnik in dvanajsternik zvežemo z ligaturami ob želodčni steni (po dve ligaturi) in med njima prerežemo. Želodec se odstrani in postavi v kivete ter nato odpre. Vsebino želodca najprej premešamo (ne da bi jo vzeli iz želodca) (kovinskih predmetov ni mogoče uporabiti), nato pa previdno vzamemo del vsebine, da je ne kontaminiramo;

b) segment Tanko črevo(dolžine do 40 cm) v najbolj prizadetem delu skupaj z vsebino (do 0,5 kg);

c) del debelega črevesa dolžine do 40 cm) v najbolj prizadetem delu skupaj z vsebino (do 0,5 kg);

d) del jeter (0,5-1 kg) s žolčnik(od velikih živali), cela jetra (od malih živali);

f) urin v količini 0,5 l;

g) skeletne mišice v količini 0,5 kg.

Poleg tega glede na značilnosti domnevne zastrupitve dodatno pošljejo:

a) pri sumu na zastrupitev skozi kožo (z injiciranjem) - del kože, tkiva in mišic z mesta predvidenega vnosa strupa;

b) pri sumu na zastrupitev s plini (ogljikov disulfid ipd.) - najbolj polnokrven del pljuč (0,5 kg), sapnik, del srca, 200 ml krvi, del vranice in možganov. Od majhnih živali (vključno z<9к числе и от птиц) берут органы целиком.

Pri odpiranju iz zemlje izkopanega trupla živali vzamejo: ohranjene notranje organe v količini do 1 kg; skeletne mišice v količini 1 kg, prst pod truplom 0,5 kg z dveh ali treh mest.

Za histološko preiskavo se pošljejo majhni koščki, ki merijo 1 x 3 x 5 cm, naslednjih organov: jetra; ledvice (nujno s prisotnostjo kortikalne in medulalne plasti); srca; pljuča; vranica; jezik; požiralnik; želodec; tanko in debelo črevo; skeletne mišice; bezgavke; možganov (polovica možganov v sterilnem kozarcu).

Kosi se vzamejo iz prizadetih območij organov in na meji z njimi iz neprizadetega dela tkiva in se dajo v 10% raztopino formalina (v razmerju 10 delov raztopine formalina za 1 del patološkega materiala).

Pri sumu na zastrupitev s snovmi za zatiranje kmetijskih škodljivcev, mineralnimi gnojili, barvami pošljite vzorce v količini od 100 do 1000 g.

Če sumite na zastrupitev, pošljite od bolnih živali: bruhanje, po možnosti prve porcije; urin (celotna pridobljena količina); iztrebki v količini 0,5 kg; vsebina želodca, pridobljena skozi ezofagealno cevko; krmo in snovi, ki bi lahko povzročile zastrupitev.

Če obstaja sum, da je do zastrupitve prišlo zaradi uživanja strupenih rastlin, se odvzamejo vzorci rastlin za botanično analizo. V ta namen se na travi travnika ali pašnika na območjih paše postavi lesen okvir z notranjo velikostjo 1 m2. Vse rastline v okvirju odrežemo s korenino. Če je travni sestoj istega tipa, se vzame vzorec z 1 ha travnika ali pašnika na 3-5 mestih, če je travni sestoj različnih vrst, se število vzorcev poveča, da se zajame več različnih rastlin in poslan je povprečen vzorec.

Če lahko odvzeti vzorec zelišč dostavimo v laboratorij v nekaj urah, se zelišča pošljejo surova, v nasprotnem primeru pa se vzorci zelišč dostavijo v škatlah ali pletenih košarah.

Vzorce odvzema veterinar ali specialist za živinorejo.

Materiala, vzetega za kemijske raziskave, ne smete prati ali hraniti skupaj s kovinskimi predmeti; pošilja se v čisti, nekonzervirani obliki. Material živalskega izvora se ohrani le, če je dostavljen v laboratorij ne prej kot 3-4 dni po odvzemu. Za ohranitev materiala se uporablja rektificirani alkohol v razmerju 1 del alkohola na 2 dela materiala. Hkrati se pošlje vzorec alkohola (vsaj 50 g), s katerim je material konzerviran.

Nemogoče je uporabiti dva konzervansa, saj sta sama strupa (kloroform) ali uničita nekatere strupe (formalin).

Material zapakirajte v čiste steklene ali glinene kozarce s širokim grlom, tesno zaprte z brušenimi zamaški, če jih ni, s čistimi, neuporabljenimi zamaški iz plute ali s čistim pisalnim ali povoščenim papirjem.

Kozarec zavijemo v čisti papir čez zamašek, zvežemo s tanko vrvico (ali debelo močno nitjo), katere konce zalepimo z voščenim pečatom.

Na vsak kozarec je nalepka, na kateri s črnilom napišejo, kateri organi in v kakšni količini (teža) so vloženi v kozarec, vrsto in ime živali, datume pogina in obdukcije živali, navedejo, kaj obstaja sum vrste zastrupitve in kdo je lastnik živali.

Odvzeti material se takoj ekspresno pošlje v laboratorij.

Postopek priprave in pošiljanja spremnih dokumentov za gradivo, poslano v raziskavo. Za vsak material, poslan v laboratorij, se izpolni spremni dokument v obrazcu v skladu s Prilogo št. 1 tega pravilnika.

Spremno pismo se pošlje v zaprti kuverti (skupaj z gradivom) po pošti ali kurirju.

Spremno pismo navaja: vrsto, spol in starost živali, od katere je bil odvzet material za študijo, njeno številko ali ime, koliko pločevink materiala, v katero študijo se material pošilja, kratek opis kliničnih znakov. in patološke spremembe.

Pri pošiljanju vzorcev krme navedite njeno ime, datum odvzema vzorca in s katerega zemljišča. Če je bila krma prejeta iz tovarne ali nabavne točke, navedite katero.

Po potrebi so v pismu vključene dodatne informacije, zlasti o tem, kakšna pomoč je bila zagotovljena živali, katera zdravila so bila uporabljena, od kdaj je bila žival hranjena itd. podatki so navedeni.

Spremnemu dopisu vzorcev krvi (brisov), ki se redno pošiljajo na serološke ali hematološke preiskave, je priložen popis vzorcev v dveh izvodih.

Obrazec spremnega dokumenta za patološki material

Vivarij je pomemben del raziskovalnih inštitutov, laboratorijev in drugih ustanov, kjer se izvajajo raziskave na živalih. Za vivarij so popolnoma neprimerni kleti ali neprimerni prostori (hlevi, gospodarska poslopja itd.) Z visoko vlažnostjo in prepihom. Stavba vivarija, tako kot vrtec za plemenske živali, naj bo zgrajena na dvignjenem in suhem mestu s pripadajočim zemljiščem. Vivarij mora imeti dovolj sončne svetlobe, območje ob prostorih pa mora biti zaščiteno pred vetrom. Ozemlje vivarija je obdano s trdno ograjo; ograjeni prostori so postavljeni v neposredni bližini glavnih prostorov.

Stavbo vivarija sestavljajo glavni prostori, v katerih so laboratorijske živali, in pomožni prostori. Vsak prostor za vivarij mora vsebovati živali iste vrste. Velike laboratorijske živali (opice, psi) so praviloma v različnih prostorih, mačke pa so tudi ločeno. Majhne živali (morski prašički, podgane, miši) so običajno nameščene v enem prostoru. Pse in zajce lahko zadržujemo na prostem, v kletkah pod pokrovom ali v pesjakih.

Pomemben in nujen del vivarija so pomožni prostori: kuhinja, soba za osebje, karantena, soba za izolacijo, umivalnica. Kuhinja za pripravo krme je opremljena s štedilnikom in hladilnikom z dovodom tople in hladne vode. Kuhinja se nahaja v eni stavbi vivarija poleg shramb za hrano. Soba za zaposlene je opremljena z individualnimi omaricami za shranjevanje delovnih oblačil in zaščitne obutve. Ob njem naj bo tuš kabina za osebje vivarija. Vse živali, ki vstopajo v vivarij, se prenesejo v glavni oddelek šele po karanteni. Karantenska soba mora biti izolirana in imeti vse potrebno za nego živali. Poleg tega je treba imeti izolacijski oddelek za bolne ali sumljive laboratorijske živali, pa tudi prostor za obdukcijo trupel. Zagotovljen je prostor za pranje, razkuževanje in sušenje kletk in druge opreme vivarija ter delovnih oblačil zaposlenih. Vivarij naj ima peč za kurjenje trupel in kopel za kopanje živali.

Bistveni del vivarija je klinika za živali. Psi so običajno sprejeti v kliniko po operacijah; v njem ostanejo, dokler si ne opomorejo iz resnega stanja po posegu. Klinika je opremljena s posebnimi celicami ali običajnimi celicami; imeti mora toplo in hladno vodo, plin ter komplet prve pomoči s potrebnimi zdravili za nego živali. Glede na naravo raziskave, ki se izvaja, je klinika opremljena s posebnimi napravami za zadrževanje živali.

Tla vivarija, zlasti glavnega oddelka, morajo biti vodoodporna in morajo biti nagnjena proti kanalizacijskim odtokom. Tla so prekrita s plastiko, metlakh ploščicami, betonom ali v skrajnem primeru asfaltom. Stene na višini 2 m od tal so prekrite z glaziranimi ploščicami, plastiko ali pobarvane z oljno barvo. Kanalizacija mora imeti široke odtoke, da se prepreči zamašitev, pokrite s kovinsko rešetko. Odpadno vodo je treba nevtralizirati pred vstopom v splošni kanalizacijski sistem.

V prostorih vivarija je poleg naravnega prezračevanja (okna, nadstropja, odpiralna okna) nameščeno dovodno in odvodno prezračevanje z večkratno izmenjavo zraka. Ogrevanje vivarija mora biti centralno, potrebno je preprečiti pojav vlage in vzdrževati temperaturo v območju 12-18 °.

Glede na profil raziskovalne ustanove (eksperimentalna kirurgija, normalna in patološka fiziologija, mikrobiologija, toksikologija itd.) je treba pri načrtovanju vivarija predvideti potrebne posebne dodatne prostore. V nekaterih primerih so ločeni prostori dodeljeni za shranjevanje laboratorijskih živali, okuženih s kulturami patogenov posebej nevarnih okužb in radioaktivnih snovi, z operacijsko sobo v vsaki od teh sob. Vsaka soba mora imeti hladilnik in potrebno opremo za okužbo živali in razrez trupel.

Vivarij mora upravljati strokovnjak za živinorejo, usposobljen za laboratorijsko rejo živali.

Psi. Pri zadrževanju psov v kletkah v glavnem delu vivarija ne sme biti prenatrpanosti, saj to ustvarja neugodne sanitarne in epidemiološke razmere z nevarnostjo hitrega širjenja okužbe na veliko skupino živali. Bolje je, da pse postavite v ločene majhne prostore s 5-6 kletkami v vsaki sobi.

Če je treba odvzeti urin, se psi namestijo v tako imenovane izmenjevalne kletke, katerih tla so iz mreže in premičnega pladnja z drenažo.

Psi s tihim laježem. Ker je zadrževanje večjega števila psov povezano z določenimi težavami zaradi hrupa, ki ga povzroča lajanje živali, se v nekaterih primerih zatečejo k podvezi povratnih živcev na obeh straneh vratu, zaradi česar pride do denervacije glasilk in psi izgubijo sposobnost lajanja.

Tehnika delovanja. Živali operiramo v morfinski anesteziji z dodatkom lokalne anestezije (0,5 ali 0,25% raztopina novokaina) ali v etrski anesteziji. Vzdolž srednje črte vratu od spodnjega roba ščitničnega hrustanca navzdol naredimo kožni rez dolžine 8-10 cm. Fascijo razrežemo skupaj s kožno mišico vratu. Obe sternohioidni mišici sta topo ločeni, leva mišica je pomaknjena navzven (slika 1). Raztopino novokaina injiciramo v tkivo med levo sternohioidno mišico in sapnikom. Ponavljajoča se veja vagusnega živca poteka skozi ozko režo med sapnikom in požiralnikom in meji na posterolateralno površino sapnika. Živec najdemo v tkivu v višini 6-10 obroča sapnika, pripeljemo ga v rano s topim kavljem in ga prekrižamo ali reseciramo za 1 cm. Ponavljajočo se vejo vagusnega živca na desni prečkamo na enak način. Upoštevati je treba, da je na ravni zgornjih trahealnih obročev ponavljajoča se veja vagusnega živca razdeljena na končne veje in prevzame razpršeni tip. Med operacijo ni mogoče prekrižati vseh malih živčnih vejic in operacija morda ne bo dala želenega rezultata.

Pri psih po prerezu ponavljajočih se živcev opazimo pojave dihalne odpovedi, zaradi česar niso primerni za kompleksne eksperimentalne operacije (L. M. Nagibin in sod., 1967; N. A. Super in sod., 1967).

Mačke. Zadrževanje mačk v vivariju je težko, ker ne prenesejo kletk. Za mačke je namenjena posebna soba, kjer imajo svobodo gibanja. V teh pogojih lahko dolgo živijo v vivariju. Prostor naj bo svetel, topel, dobro prezračen, s policami za posedanje mačk. Na tleh prostora je urejeno stranišče, ki je škatla, napolnjena s suhim peskom, šoto in žagovino. Škatlo je treba pogosto čistiti, vonj v prostoru lahko odpravite s kalijevim permanganatom.

Kunci in male laboratorijske živali. Živali so v kletkah, nameščenih na stojalih, nameščenih v obliki baterij, ali kompletih kletk, nameščenih na kolesih. Kletke so nameščene na stojalih na razdalji 30-50 cm od sten, spodnja vrsta kletk naj bo 50-70 cm od tal. Med tlemi kletk na regalih ali baterijah pustimo prehod najmanj 1 m z vodoodpornim materialom, ki preprečuje padanje iztrebkov na spodaj nameščene kletke.

Glede na vrsto živali se priporočajo naslednje velikosti kletk (V.N. Ivanov, 1967): za miši (10-20 živali) - 200X300X150 mm, za podgane (10-15 živali) - 334X450X200 mm, za morske prašičke (5- 10 živali) - 486X450X200 mm, za kunce (1-2 glede na starost in pasmo) - 486X450X300 mm.

Kletke so izdelane iz različnih materialov: kositra, žice, jekla,
vezan les, plastika itd. Biti morajo trpežni in varčni, enostavni za čiščenje ter odporni na razkužila in toplotno obdelavo. Kletke iz nerjavečega jekla so najbolj primerne za delo z radioaktivnimi izotopi.

riž. 1. Operacija izolacije in križanja vej povratnih živcev za ustvarjanje tihega laježa pri psih.
1. levi reženj ščitnice; 2 - starostna veja vagusnega živca; 3 - leva sternohioidna mišica (vlečena s kavljem); 4 - požiralnik; 5-sapnik.

Prostor, v katerem so kletke z živalmi, mora biti dobro prezračen, relativna vlažnost zraka mora biti znotraj 40-45%. Tudi pri dovodnem in izpušnem prezračevanju je za zmanjšanje vsebnosti amoniaka in živalskih odpadkov v zraku priporočljivo uporabiti šotno podlago ali žagovino z dodatkom superfosfata. Postopek zbiranja celic je mogoče avtomatizirati; čiščenje se izvaja 1-2 krat na dan.

Na sprednjo steno kletke namestijo krmilnico, avtomatski napajalnik in obesijo tablo, na katero so vpisani osnovni podatki o živali, vrsta kirurškega posega ipd.

Zajci in morski prašički so pogosto zunaj vivarija. Da bi to naredili, uporabljajo kletke, ki jih postavijo v več nivojih pod skupno streho. Zunanja namestitev pomaga vzgojiti zdrave kunce, ki so bolj odporni na različne bolezni in je večinoma pogosta v drevesnicah.